熊果酸干预骨髓间充质干细胞增殖与成骨分化
刘耀辉1
黄振明1
何精选2
黄玲华1
李建平3
1.武汉市第九医院骨科,湖北省武汉市,4300812.长江航运总医院骨科,湖北省武汉市,4300003.武汉大学人民医院骨关节外科,湖北省武汉市,430000
摘要：背景:熊果酸可通过Wnt信号通路抑制破骨细胞增殖分化,对胶原诱导性关节炎模型大鼠有抗炎和骨保护作用,但是熊果酸对大鼠骨髓间充质干细胞增殖、分化以及Wnt/β-catenin信号通路相关基因和蛋白表达的影响尚不明确.目的:探讨熊果酸对骨髓间充质干细胞增殖、分化及Wnt信号通路的影响.方法:采用全骨髓贴壁法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,不同浓度(1.0,2.5,5.0,10.0,20.0μmol/L)熊果酸作用骨髓间充质干细胞,以不含熊果酸的培养基为对照组,MTT法检测熊果酸对骨髓间充质干细胞增殖的影响.用含不同浓度(1.0,2.5,5.0μmol/L)熊果酸的成骨诱导液培养骨髓间充质干细胞,以不含熊果酸的成骨诱导液为对照组,在诱导后第7天和第14天采用ELISA法检测碱性磷酸酶活性和骨钙素水平,在诱导第14天采用RT-PCR检测成骨基因ALP、COL-I、OCN、OPN、RUNX2 mRNA表达水平,采用RT-PCR和Western blot法检测Wnt信号通路相关Wnt-3α、GSK-3β、β-catenin mRNA和蛋白表达.结果与结论:①不同浓度熊果酸均可促进骨髓间充质干细胞增殖,浓度为5.0μmol/L时增殖率最高;②骨髓间充质干细胞成骨诱导第7天和第14天时碱性磷酸酶活性和骨钙素水平均比对照组增高,差异有显著性意义(P<0.05),且诱导相同时间,随熊果酸浓度增加碱性磷酸酶活性增强,骨钙素水平升高(P<0.05);③诱导14 d,熊果酸可促进骨髓间充质干细胞分化后成骨基因ALP、COL-I、OCN、OPN、RUNX2 mRNA表达以及Wnt信号通路相关Wnt-3α、GSK-3β、β-catenin mRNA和蛋白表达,随熊果酸浓度增加其表达水平升高(P<0.05);④结果表明,熊果酸通过Wnt/β-catenin信号通路促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞定向分化.
关键词：熊果酸骨髓间充质干细胞细胞增殖成骨分化碱性磷酸酶骨钙素成骨基因Wnt信号通路
分类号：R459.9(治疗学)R394.2(医学遗传学)
资助基金：中央高校基本科研业务费专项(2042016kf0095)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 2665-2671 )
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