溶血磷脂酸刺激可影响成骨细胞表达结缔组织生长因子
胡广
张开伟
徐远坤
1.贵阳中医学院第一附属医院骨科,贵州省贵阳市,5500012.贵阳中医学院第一附属医院骨科,贵州省贵阳市,5500013.贵阳中医学院第一附属医院骨科,贵州省贵阳市,550001
摘要：背景:溶血磷脂酸可刺激上皮细胞和成肌细胞表达结缔组织生长因子2,但涉及的分子机制至今仍不清楚.成骨细胞是骨发育和骨折愈合中的重要细胞,其也表达溶血磷脂酸的受体,骨折局部高表达溶血磷脂酸和成骨细胞,且结缔组织生长因子2在骨折愈合中发挥主要作用.目的:研究外源性溶血性磷脂酸对成骨细胞中结缔组织生长因子2表达水平的影响及其分子机制.方法:①体外培养MC3T3-E1细胞,将细胞分为对照组和实验组,对照组仅给予矿化诱导液,实验组在矿化诱导液中加入终浓度为20μmol/L的溶血磷脂酸,刺激0.5,1,2,4,6,8及12 h,提取RNA并检测结缔组织生长因子2 mRNA表达水平;②MC3T3-E1细胞预先经蛋白激酶A抑制剂(H-89)和蛋白激酶C抑制剂(Staurosporine)处理0.5 h,再加入溶血磷脂酸.定量PCR检测结缔组织生长因子2 mRNA表达水平、Western Blot法检测结缔组织生长因子2蛋白表达水平,Western blot法和免疫荧光检测细胞蛋白激酶C转位情况.结果与结论:①溶血磷脂酸作用于MC3T3-E1细胞后,可迅速引起细胞内结缔组织生长因子2 mRNA和蛋白表达水平提高,刺激后2 h其表达量达到峰值,随后表达水平随时间逐渐降低,至8 h和12 h已基本恢复至刺激前的表达水平;②Staurosporine可明显减弱溶血磷脂酸刺激成骨细胞表达结缔组织生长因子2的能力;而H-89则可以使溶血磷脂酸刺激成骨细胞表达结缔组织生长因子2的能力进一步增强;③成骨细胞经溶血磷脂酸刺激15 min后,溶血磷脂酸可明显提高细胞膜蛋白激酶C表达水平,同时胞浆中蛋白激酶C表达水平降低;④结果提示,溶血磷脂酸可刺激成骨细胞表达结缔组织生长因子2,这一过程可能涉及蛋白激酶A和蛋白激酶C途径.
关键词：溶血磷脂酸骨折愈合成骨细胞骨形成结缔组织生长因子蛋白激酶A蛋白激酶C骨缺损
分类号：R459.9(治疗学)R392.7(医学免疫学)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 2959-2964 )
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