人脐血间充质干细胞对小鼠骨髓巨噬细胞M2亚型的转化作用
陈柄全
彭漪
肖轶
彭智勇
赵吉玲
余国龙
1.中南大学湘雅医院心内科,湖南省长沙市,4100082.中南大学湘雅医院心内科,湖南省长沙市,4100083.中南大学湘雅医院心内科,湖南省长沙市,4100084.中南大学湘雅医院心内科,湖南省长沙市,4100085.中南大学湘雅医院心内科,湖南省长沙市,4100086.中南大学湘雅医院心内科,湖南省长沙市,410008
摘要:背景:间充质干细胞已经被用于多种疾病的治疗,且研究表明间充质干细胞可能是通过促进巨噬细胞向M2亚型转化来产生生物效应,但这种效应是否呈量效、时效关系及其转化效应是否需要细胞间直接接触尚不明确.目的:验证人脐血间充质干细胞对巨噬细胞M2亚型转化效应,并探讨人脐血间充质干细胞对巨噬细胞M2亚型转化效应的剂量与时间相关性.方法:从小鼠骨髓中提取单核细胞,采用巨噬细胞集落刺激因子诱导产生M0型巨噬细胞(F4/80+,CD11B+).将M0型巨噬细胞以1×106/孔密度植入Transwel板或6孔培养板中,分别以不同密度(0,2×105,4×105)人脐血间充质干细胞在含有脂多糖(100μg/L)/干扰素γ(20μg/L)完全培养基中直接或间接共培养24,48 h.显微镜下观察巨噬细胞形态学改变,流式细胞仪检测M2型巨噬细胞(CD206+,CD11C-)占整体比例,ELISA检测细胞培养上清液白细胞介素10、白细胞介素6和白细胞介素1β水平.结果与结论:①与人脐血间充质干细胞共培养后,巨噬细胞触角伸长,呈长索状M2型细胞形态特征;②与人脐血间充质干细胞直接共培养、间接共培养24,48 h,M2型巨噬细胞百分比显著性增加(P<0.05);③人脐血间充质干细胞低浓度与高浓度组间比较,M2型巨噬细胞百分比差异无显著性意义;④直接或间接培养48 h的M2型巨噬细胞百分比均显著高于24 h,差异有显著性意义(P<0.05).⑤人脐血间充质干细胞直接共培养、间接共培养上清中促炎性细胞因子白细胞介素6、白细胞介素1β水平显著减少,而抑炎性细胞因子白细胞介素10水平显著增加(P<0.05);⑥直接或间接共培养48 h抑炎性细胞因子白细胞介素10水平均较24 h显著上升(P<0.05);⑦结果表明,人脐血间充质干细胞与巨噬细胞直接与间接接触均促进巨噬细胞M2亚型转化,其转化效应有时效依赖性,而与细胞浓度无相关性.
关键词:人脐血间充质干细胞巨噬细胞巨噬细胞M1/M2亚型M2亚型转化效应炎症反应直接共培养间接共培养国家自然科学基金
分类号:R459.9(治疗学)R394.2(医学遗传学)
资助基金:国家自然科学基金(81570266)湖南省自然科学基金重点项目(2015SK2025)
论文发表日期:2019-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 3987-3992 )
英文信息
