过表达GATA-4骨髓间充质干细胞外泌体中miR-330-3p的时-量变化
贺继刚1
谢巧丽1
王梓豪1
严丹2
张宏波2
1.云南省第一人民医院,昆明理工大学附属医院心脏大血管外科,云南省昆明市 6500322.云南省第一人民医院,昆明理工大学附属医院重症医学科,云南省昆明市 650032
摘要：背景:前期实验已经证明过表达GATA-4骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)分泌的外泌体(exosomes)可以通过抑制心肌细胞凋亡,有效修复心肌梗死引起的心肌损伤,进一步发现在其外泌体中miRNA-330-3p明显高表达且功能涉及抗凋亡,提示miRNA-330-3p可能是外泌体修复心肌损伤的关键分子.目的:探讨过表达GATA-4小鼠BMSCs分泌的外泌体(BMSCsGATA-4-exosomes)中miR-330-3p的时-量变化.方法:在过表达 GATA-4 小鼠 BMSCs 培养体系内加入 miR-330-3p 模拟剂(miR-330-3p-mimic)及抑制剂(miR-330-3p-inhibitor)作为 BMSCsGATA-4-miR-330-3p-mimic组及 BMSCsGATA-4-miR-330-3p-inhibitor组,将 BMSCsGATA-4组、BMSCsGATA-4-空载体组、BMSCs组、BMSCsGATA-4-miR-330-3p-mimic-空载体组及BMSCsGATA-4-miR-330-3p-inhibitor-空载体组作为混杂因素对照组.上述各组与基因开启剂强力霉素共培养24,48 h,提取各组细胞分泌的外泌体.采用RT-PCR 检测各组细胞及其外泌体内 miR-330-3p 的表达量.采用光镜评估 BMSCsGATA-4-miR-330-3p-mimic组、BMSCsGATA-4-miR-330-3p-inhibitor组与BMSCs组细胞在24,48 h的形态变化.结果与结论:①BMSCsGATA-4-miR-330-3p-mimic组细胞与外泌体内 miR-330-3p 的表达率最高,且随着时间推移其miR-330-3p的表达逐渐增多;②BMSCsGATA-4-miR-330-3p-inhibitor组细胞与外泌体内miR-330-3p的表达率最低,且随着时间推移其 miR-330-3p 的表达逐渐减少;③BMSCsGATA-4-miR-330-3p-mimic组、BMSCsGATA-4-miR-330-3p-inhibitor组与BMSCs组在24,48 h的形态无变化;④结果表明,BMSCs内miR-330-3p表达与外泌体内miR-330-3p表达正相关,BMSCs过表达miR-330-3p可以有效提高外泌体中miR-330-3p的表达,而静默miR-330-3p可以有效减少外泌体中miR-330-3p的表达.
关键词：心肌梗死心肌损伤骨髓间充质干细胞GATA-4外泌体miR-330-3p
分类号：R459.9(治疗学)R394.2(医学遗传学)R284(中药学)
资助基金：国家自然科学基金(81460073)云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项(2014FB089)云南省教育厅科研项目(2015Z051)中国博士后科学基金(2015M582764XB)成都医学院科研项目(CYZ15-18)云南省医学后备人才(H-201607)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 4617-4622 )
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