釉原蛋白羧基末端肽加速细胞周期促进成釉细胞系ALC细胞增殖
刘敏1
王睿捷1
宋丹阳1
杨随1
谭陶2
王磊1
王衣祥3
1.北京大学口腔医院修复科,北京市,1000812.北京大学首钢医学院口腔科,北京市,1001443.北京大学口腔医院中心实验室,北京市,100081
摘要：背景:釉原蛋白羧基末端肽(C-terminus of the amelogenin peptide,AMG-CP)作为一种小分子内源性短肽,在物种间的序列高度保守,提示其在牙齿发育过程中参与重要的生理过程.有研究表明AMG-CP对成牙骨质细胞、骨髓间充质干细胞、牙周膜成纤维细胞的增殖分化有调控作用,但是AMG-CP对成釉细胞生物学功能的影响尚未见报道.目的:探究不同质量浓度AMG-CP对成釉细胞系ALC细胞增殖的影响及相关机制.方法:人工合成并通过液相色谱和质谱检测AMG-CP合成情况.使用xCELLigence RTCA实时细胞分析系统观察0,0.5,1,2 mg/L AMG-CP对ALC细胞增殖的影响.流式细胞仪检测0,1,2 mg/L AMG-CP对ALC细胞周期的影响.Real-time PCR检测0,1,2 mg/L AMG-CP对ALC细胞的细胞周期蛋白Cyclin D1、CDK4、MCM2、MCM5 mRNA表达水平的影响.Western blot检测0,1 mg/L AMG-CP对ALC细胞表达细胞增殖相关通路中p-ERK1/2、total-ERK1/2表达水平的影响.利用MAPK-ERK1/2通路抑制实验,在ERK阻断剂U0126作用下阻断ERK1/2磷酸化,检测AMG-CP对ALC细胞增殖能力的影响.结果与结论:①与对照组比较,AMG-CP促进ALC细胞增殖,群体倍增时间降低,并存在浓度梯度依赖性;②与对照组比较,AMG-CP具有加速细胞周期的作用;③与对照组比较,AMG-CP可以上调细胞周期相关基因Cyclin D1、CDK4、MCM2、MCM5的表达;④与对照组比较,AMG-CP可以上调p-ERK1/2表达,激活MAPK-ERK1/2信号通路;⑤U0126抑制MAPK-ERK1/2通路激活后,AMG-CP失去对ALC细胞促增殖作用;⑥以上结果证实AMG-CP可以激活MAPK-ERK1/2通路,加速细胞周期,进而促进ALC细胞增殖,提示AMG-CP具有促进成釉细胞增殖的潜能.
关键词：釉原蛋白羧基末端肽釉原蛋白成釉细胞细胞增殖细胞周期MAPK-ERK信号通路牙釉质发育
分类号：R459.5(治疗学)R394.2(医学遗传学)R783(口腔矫形学、牙科美学)
资助基金：国家自然科学基金(81470770)北京市自然科学基金(7172240)北京市自然科学基金(7182181)
论文发表日期：2020-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 99-105 )
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