慢病毒介导骨形态发生蛋白7基因转染诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞的分化
张文
雷堃
高磊
李宽新
1.石河子大学第二附属医院(新疆生产建设兵团医院)关节脊柱外科,新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市,8300002.石河子大学第二附属医院(新疆生产建设兵团医院)关节脊柱外科,新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市,8300003.石河子大学第二附属医院(新疆生产建设兵团医院)关节脊柱外科,新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市,8300004.石河子大学第二附属医院(新疆生产建设兵团医院)关节脊柱外科,新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市,830000
摘要：背景:骨髓间充质干细胞具备向神经元样细胞分化的潜能,已经被列为治疗脊髓损伤的首选干细胞,但其分化效率低,寻找一种具有高效诱导能力的因子尤为重要.基于文献查阅及课题组研究基础,推测骨形态发生蛋白7(bone morphogenetic protein 7,BMP-7)基因可能在促进骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化上发挥着重要作用.目的:探讨骨形态发生蛋白7慢病毒载体转染诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的作用.方法:采用全骨髓贴壁法培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,以感染复数为50,25,10,1进行LV-GFP转染,转染后3 d在荧光倒置显微镜下观察各组GFP表达情况,确定最佳感染复数.取第3代骨髓间充质干细胞,分为空白对照组(常规培养)、LV-GFP组、LV-BMP-7-GFP组,以最佳感染复数转染24,48,72,96,120 h后,采用MTT法检测细胞存活率;转染3 d后,采用免疫细胞化学实验检测神经细胞标记物神经丝蛋白200、突触素1表达.结果与结论:①LV-GFP转染后3 d,感染复数为1组未见GFP阳性细胞,感染复数为10,25,50组可见GFP阳性细胞,其中感染复数为10组平均荧光强度高于其余组(P<0.05),为最适感染复数;②空白对照组、LV-GFP组神经丝蛋白200、突触素1表达呈阴性;LV-BMP-7-GFP组神经丝蛋白200、突触素1表达呈阳性,胞体和轴突被染成亮棕黄色;③结果表明,LV-BMP-7转染可促进骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化.
关键词：骨形态发生蛋白7骨髓间充质干细胞神经细胞细胞分化神经丝蛋白200突触素1
分类号：R459.9(治疗学)R394.2(医学遗传学)R651.2(外科学各论)
资助基金：国家自然科学基金(81560216)
论文发表日期：2020-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 985-990 )
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