骨碎补总黄酮联合纳米骨材料促进MC3T3-E1细胞的增殖分化
李晋玉1
俞兴1
姜俊杰2
徐林1
赵学千1
孙旗1
郑晨颖1
白春晓1
刘楚吟1
贾育松1
1.北京中医药大学东直门医院,北京市,1007002.中国中医科学院中医临床基础医学研究所,北京市,100700
摘要：背景:前期研究发现,骨碎补总黄酮可促进纳米骨材料表面MC3T3-E1细胞的成骨分化,其作用机制有待进一步研究.目的:探究骨碎补总黄酮联合纳米骨材料对MC3T3-E1细胞发挥作用的机制.方法:将MC3T3-E1细胞与纳米骨材料共培养,选取100 mg/L和250 mg/L骨碎补总黄酮进行药物干预,以10μg/L转化生长因子β刺激为阳性对照组.分组如下:①正常组;②DKK1组:Wnt通路抑制剂DKK1(0.1 mg/L)阻断Wnt/β-catenin信号通路;③DKK1+转化生长因子β组;④DKK1+100 mg/L骨碎补总黄酮组;⑤DKK1+250 mg/L骨碎补总黄酮组;⑥DKK1+纳米骨+转化生长因子β组;⑦DKK1+纳米骨+100 mg/L骨碎补总黄酮组;⑧DKK1+纳米骨+250 mg/L骨碎补总黄酮组.在干预24,48 h后收获细胞,免疫荧光双染法观察Wnt/β-catenin通路中Wnt与LRP结合情况,Real-time PCR和Western blot检测β-catenin、LRP5、Gsk-3β、Cyclin D1、RUNX2的表达.结果与结论:①激光共聚焦扫描显微镜下显示DKK1+转化生长因子β组、DKK1+250 mg/L骨碎补总黄酮组、DKK1+纳米骨+转化生长因子β组、DKK1+纳米骨+250 mg/L骨碎补总黄酮组棕黄色染色较明显,表明Wnt与LRP结合较其他组更好;②Real-time PCR和Western blot结果显示,骨碎补总黄酮可促进β-catenin、LRP5、RUNX2的表达,下调GSK-3β的表达,说明骨碎补总黄酮通过激活经典Wnt/β-catenin信号通路促进成骨细胞增殖分化,且骨碎补总黄酮诱导的基因活化呈剂量依赖性.
关键词：骨碎补总黄酮纳米骨Wnt/β-catenin信号通路成骨细胞MC3T3-E1细胞
分类号：R459.9(治疗学)R394.2(医学遗传学)R336(人体生理学)
资助基金：国家自然科学基金(81503601)国家自然科学基金(81603517)北京中医药大学东直门医院青苗人才项目(DZMYS-201802)
论文发表日期：2020-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1030-1036 )
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