人椎间盘髓核细胞增殖活性与益肾活血通络方的干预调控
陈江1
肖辉灯2
孙旗1
张帆1
祝永刚2
刘志超2
郭菲宇2
柳根哲2
1.北京中医药大学东直门医院,北京市,1007002.首都医科大学附属北京中医医院,北京市,100010
摘要：背景:NF-κB信号通路与椎间盘退变的关系是骨科学术界研究热点,深入研究椎间盘中各种信号通路的作用,有助于了解椎间盘退变的发生机制.目的:通过研究不同静水压压力下益肾活血通络方含药血清对人椎间盘髓核细胞NF-κB信号通路的调控作用,以期能从分子生物学角度探讨益肾活血通络方治疗椎间盘退变性疾病的可能机制及作用靶点.方法:将第3代人椎间盘髓核细胞分为8组,分别加入益肾活血通络方含药血清,在体外不同静水压加载条件(0.3,1,3 MPa)下作用2,4,6 h后,使用倒置相差显微镜观察椎间盘髓核细胞的形态及生长状况;使用透射电镜观察椎间盘髓核细胞的超微结构;采用CCK-8法检测各组髓核细胞的增殖活性;采用Annexin V-FITC/Propidium Iodide凋亡试剂盒检测髓核细胞的凋亡率;采用Western blot法检测髓核细胞内NF-κB p65、Col agenⅡ、ADAMTS-4、MMP-13、Caspase-3的表达.结果与结论:①在同一压力及作用时间下压力+中药血清组髓核细胞形态较常压组、单纯压力组更完整,生长状况更好,其中0.3,1 MPa压力+中药血清组优于3 MPa压力+中药血清组;②压力+中药血清组髓核细胞增殖活性更高,其中0.3 MPa压力+中药血清组与0.3 MPa单纯压力组比较差异有显著性意义(P<0.05);③压力+中药血清组椎间盘髓核细胞的凋亡率较常压组、单纯压力干预组低(P<0.05);④与单纯压力组比较,压力+中药血清组Col agenⅡ、Caspase-3表达增加,NF-κB p65、ADAMTS-4、MMP-13表达减少(P<0.05);⑤结果表明,益肾活血通络方能增加细胞活性,减少细胞凋亡,有效延缓髓核细胞的退变,其机制可能与椎间盘髓核细胞NF-κB信号通路促进Col agenⅡ、Caspase-3表达,抑制NF-κB p65、ADAMTS-4、MMP-13表达有关.
关键词：静水压NF-κB信号通路髓核细胞益肾活血通络方椎间盘退变
分类号：R459.9(治疗学)R318(医用一般科学)R285.5(中药学)
资助基金：国家自然科学基金(81603638)基本科研业务费项目(2017-JYB-JS-085)中央高校基本科研业务费专项(2018-JYB-XJQ010)基本科研业务费项目(2019-JYB-JS-042)北京中医药大学东直门医院青苗人才项目(DZMYS-201702)
论文发表日期：2020-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1200-1206 )
英文信息