脱细胞羊膜支架复合Scleraxis慢病毒转染的人羊膜间充质干细胞促进兔腱-骨愈合
张骏
杨继滨
金瑛
邹刚
汤井沣
葛振
杨启帆
刘毅
1.遵义医科大学附属医院骨一科,贵州省遵义市 5630002.遵义医科大学附属医院骨一科,贵州省遵义市 5630003.遵义医科大学附属医院骨一科,贵州省遵义市 5630004.遵义医科大学附属医院骨一科,贵州省遵义市 5630005.遵义医科大学附属医院骨一科,贵州省遵义市 5630006.遵义医科大学附属医院骨一科,贵州省遵义市 5630007.遵义医科大学附属医院骨一科,贵州省遵义市 5630008.遵义医科大学附属医院骨一科,贵州省遵义市 563000
摘要：背景:脱细胞羊膜支架是一种天然支架,具有良好的生物相容性,已经广泛应用于组织工程的相关领域.Scleraxis能够促进人羊膜间充质干细胞向人韧带细胞分化,进而促进腱-骨愈合.目的:探讨脱细胞羊膜支架复合Scleraxis慢病毒转染的人羊膜间充质干细胞能否促进兔腱-骨愈合.方法:①体外分离培养人羊膜间充质干细胞,经过传代培养后观察细胞的形态;②体外构建Scleraxis慢病毒然后以最适感染复数转染第3代人羊膜间充质干细胞,q-PCR检测其转染效率;③用酶消化法制备脱细胞羊膜支架,然后体外将转染Scleraxis慢病毒的人羊膜间充质干细胞接种到脱细胞羊膜支架上面,鬼笔环肽染色观察细胞在支架上的生长情况;④将脱细胞羊膜支架复合转染Scleraxis慢病毒的人羊膜间充质干细胞包裹新西兰大白兔跟腱,然后移植到骨隧道内,观察其对腱-骨愈合的影响.结果与结论:①第3代人羊膜间充质干细胞呈贴壁生长,细胞生长状态良好;②Scleraxis慢病毒转染后96 h表达稳定的绿色荧光,Slclerxis的mRNA表达水平明显提高,说明转染成功;③脱细胞羊膜支架的上皮细胞基本消失,证明脱细胞比较彻底,同时其基底层完整保留,细胞外基质成分仍然存在;④通过鬼笔环肽染色发现细胞在脱细胞羊膜支架上生长良好,增殖未受到影响;⑤体内实验结果提示:人脱细胞羊膜支架复合Scleraxis慢病毒转染的人羊膜间充质干细胞具有促进腱-骨愈合的作用.
关键词：羊膜间充质干细胞脱细胞羊膜脱细胞羊膜支架腱-骨愈合Scleraxis组织工程
分类号：R459.9(治疗学)R394.2(医学遗传学)R686(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)
资助基金：贵州省科学技术基金项目(黔科合LH[2017]7015号)
论文发表日期：2020-05-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 2061-2067 )
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