过表达GATA-4骨髓间充质干细胞分泌的外泌体促进骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化
贺继刚1
王梓豪1
谢巧丽1
李洪荣1
严丹2
李永武1
1.云南省第一人民医院,昆明理工大学附属医院,心脏大血管外科,云南省昆明市 6500322.云南省第一人民医院,昆明理工大学附属医院重症医学科,云南省昆明市 650032
摘要：背景:前期证明,过表达心脏基因转录因子GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞分泌的外泌体(BMSCsGATA-4-exosome)可以促进BMSCs向心肌样细胞分化,提示其可以修复心肌梗死,另外还发现BMSCsGATA-4-exosome中及心肌梗死局部心肌组织中有miRNA-673-5p明显高表达且功能涉及细胞分化,可能是BMSCs GATA-4-exosome修复心肌梗死的关键分子.目的:探讨BMSCs GATA-4-exosome促进BMSCs向心肌样细胞分化的分子调控网络.方法:在小鼠BMSCs培养体系内加入miRNA-673-5p模拟物(miR-673-5p-mimic)作为实验组(BMSCsmiR-673-5p-mimic),将BMSCs GATA-4组、BMSCs GATA-4-空载体组、BMSCs组、BMSCsmiR-673-5p-inhibitor组作为混杂因素对照组,提取各组分泌的外泌体与BMSCs直接共培养24 h,采用免疫荧光定性检测和RT-PCR定量检测各组BMSCs中心肌特异性分子α-actin、Desmin、cTnT、Cx43的表达.根据microRNA靶基因预测结果,采用Western blot检测miRNA-673-5p对应靶基因TSC-1、ERK1/2及Mef2c转录蛋白表达.结果与结论:BMSCsmiR-673-5p-mimic-exosome+BMSCs组荧光强度最强,心肌细胞特异性分子α-actin、Desmin、cTnT、Cx43的表达最高(P<0.05),TSC-1的表达最低(P<0.05).结果表明BMSCsGATA-4-exosome通过miRNA-673-5p抑制TSC-1蛋白表达促进BMSCs向心肌样细胞分化.
关键词：miRNA-673-5pTSC-1蛋白GATA-4外泌体小鼠骨髓间充质干细胞
分类号：R459.9(治疗学)R394.2(医学遗传学)R284(中药学)
资助基金：国家自然科学基金(81460073)云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项(2014FB089)云南省教育厅科研项目(2015Z051)中国博士后科学基金(2015M582764XB)成都医学院科研项目(CYZ15-18)云南省医学后备人才(H-201607)
论文发表日期：2020-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 2965-2971 )
英文信息