碱性成纤维细胞生长因子拮抗细胞外炎性因子保护软骨细胞
杨帆1
刘保一2
曹孟2
朱小姝3
张于2
覃开蓉4
赵德伟1
1.大连理工大学生物医学工程系,辽宁省大连市 116024;大连大学附属中山医院骨科,辽宁省大连市1160012.大连大学附属中山医院骨科,辽宁省大连市1160013.中山大学附属第八医院,广东省深圳市5180334.大连理工大学生物医学工程系,辽宁省大连市 116024
摘要：背景:目前对于碱性成纤维细胞生长因子促进软骨细胞增殖以及白细胞介素1等炎性因子破坏软骨细胞结构的研究较多,但尚未有二者联合对软骨细胞影响的报道.目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子和炎性因子对软骨细胞增殖、分化的影响.方法:取体外培养第3代SD大鼠软骨细胞分为4组:①空白对照组:软骨细胞单独培养;②阴性对照组:加入含肿瘤坏死因子α、白细胞介素1和白细胞介素6的无血清DMEM/F12培养基进行培养;③阳性对照组:加入含碱性成纤维细胞生长因子的无血清DMEM/F12培养基进行培养;④实验组:加入含肿瘤坏死因子α、白细胞介素1、白细胞介素6和碱性成纤维细胞生长因子的无血清DMEM/F12培养基进行培养.CCK-8法检测第3,5,7天各组软骨细胞的增殖活性;ELISA检测第3,5,7天各组软骨细胞中炎性因子水平;免疫荧光染色检测第7天各组软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的蛋白水平;Real time-PCR检测第3,5,7天各组软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的mRNA水平.结果 与结论:①4组软骨细胞在3个时间点增殖情况,阳性对照组＞实验组＞空白对照组＞阴性对照组;②与空白对照组相比,阴性对照组白细胞介素1、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α水平明显升高(P＜0.05);与阴性对照组相比,实验组白细胞介素1、白细胞介素6和含肿瘤坏死因子α水平明显降低(P＜0.05);③空白对照组、阳性对照组、实验组Ⅱ型胶原和蛋白聚糖染色均呈现阳性,阳性对照组软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白聚糖表达最显著;④与空白对照组相比,阳性对照组、实验组Ⅱ型胶原和蛋白聚糖在各时间点表达均上调,差异有显著性意义(P＜0.05);而阴性对照组Ⅱ型胶原和蛋白聚糖在各时间点表达均下调,与空白对照组比较差异有显著性意义(P＜0.05);⑤结果表明,合理应用碱性成纤维细胞生长因子能有效维持软骨细胞的表型,抑制去分化,促进细胞增殖.
关键词：软骨细胞细胞增殖细胞分化碱性成纤维细胞生长因子白细胞介素1白细胞介素6肿瘤坏死因子α
分类号：R459.9(治疗学)R318(医用一般科学)R681(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)
资助基金：中国博士后科学基金面上项目(2017M621116)大连市高层次人才创新支持计划-科技之星项目(2017RQ154)辽宁省博士启动基金(201601299)辽宁省教育厅科学研究一般项目(L2015021)
论文发表日期：2020-08-11
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 3621-3626 )
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