成骨诱导因子Nell-1及Noggin短发卡RNA联合转染脂肪间充质干细胞的促成骨分化能力
刘浩1
刘军1
芮永军1
汤峰林2
陆淼2
丁涛2
1.无锡市第九人民医院骨科,江苏省无锡市 2140002.南京医科大学附属无锡人民医院骨科,江苏省无锡市 214000
摘要：背景:Nell-1在诱导成骨分化和新骨形成中的作用已有报道,但试图通过双基因联合转染起协同成骨作用的研究很少.目的:体外环境下抑制细胞中Noggin基因的同时上调Nell-1基因,观察其对脂肪间充质干细胞成骨分化能力的影响.方法:取健康成年大鼠脂肪组织获取脂肪间充质干细胞.将细胞分为3组,对照组转染空载体病毒Lv-EGFP(增强型绿色荧光蛋白),Nell-1组单纯转染Lv-Nell-1,Nell-1+Noggin shRNA组同时转染Lv-Nell-1和Lv-Noggin shRNA.转染后3,7,14 d,应用实时荧光定量PCR检测Nell-1及成骨相关标志物(Col-Ⅰ、ALP、OCN)的表达,转染后14 d行茜素红染色.结果与结论:①转染后3 d,对照组Nell-1 mRNA相对表达量与Nell-1组比较,差异无显著性意义(P>0.05).与Nell-1+Noggin shRNA组比较,对照组和Nell-1组Nell-1 mRNA表达量偏低,差异均有显著性意义(P<0.05).转染后7,14 d,Nell-1+Noggin shRNA组Nell-1 mRNA相对表达量仍高于对照组和Nell-1组,且Nell-1组高于对照组,两两比较差异均有显著性意义(P<0.05);②转染后3,7,14 d,Nell-1+Noggin shRNA组各成骨基因mRNA相对表达量均显著高于对照组和Nell-1组,且Nell-1组高于对照组,组间比较差异有显著性意义(P<0.05);③转染后14 d,Nell-1+Noggin shRNA组呈现较多细胞聚集形成的结节,Nell-1组钙结节数量少于Nell-1+Noggin shRNA组,对照组未见明显被染色的钙结节;④实验结果表明,Nell-1基因可以促进大鼠脂肪间充质干细胞成骨分化,而干扰Noggin基因会上调Nell-1基因的表达,形成显著的协同成骨分化作用.
关键词：Nell-1Noggin共转染脂肪间充质干细胞成骨分化
分类号：R459.9(治疗学)R394.2(医学遗传学)R318(医用一般科学)
资助基金：南京医科大学科技发展基金重点项目(2016NJMUZD069)
论文发表日期：2020-11-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 4966-4970 )
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