黏着斑激酶诱导小鼠胚胎成纤维细胞成骨分化的作用及机制
李震
黄永辉
孙继芾
孙海涛
1.江苏大学附属医院,江苏省镇江市 2120002.江苏大学附属医院,江苏省镇江市 2120003.江苏大学附属医院,江苏省镇江市 2120004.江苏大学附属医院,江苏省镇江市 212000
摘要：背景:黏着斑激酶被作为骨组织工程中"生物材料/支架""种子细胞""生长因子"3个要素的桥梁分子,研究其在相关种子细胞成骨分化过程中的作用及机制,对于骨组织工程的发展及应用尤为重要.目的:探讨黏着斑激酶在诱导永生化小鼠胚胎成纤维细胞成骨分化过程中的作用及机制.方法:在相同的诱导条件下诱导野生型及黏着斑激酶敲除后小鼠胚胎成纤维细胞成骨分化,在相同的诱导条件下诱导经磷脂酰肌醇3-激酶特异性磷酸化抑制剂和细胞外调节蛋白激酶磷酸化抑制剂处理的野生型及黏着斑激酶敲除后小鼠胚胎成纤维细胞成骨分化.在显微镜下观察不同诱导时期细胞形态改变,蛋白免疫印迹技术检测早期成骨相关蛋白表达水平及相应的磷脂酰肌醇3-激酶、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶、细胞外调节蛋白激酶磷酸化水平,Real-time PCR检测成骨相关基因转录水平,最后在成骨诱导3周后对诱导细胞进行茜素红钙结节染色.结果与结论:①相同的诱导条件下黏着斑激酶敲除后小鼠胚胎成纤维细胞的成骨效应较保留斑激酶的小鼠胚胎成纤维细胞组明显下降;②加入磷脂酰肌醇3-激酶特异性磷酸化抑制剂处理的野生型及黏着斑激酶敲除后,小鼠胚胎成纤维细胞与对照组相比成骨相关蛋白表达水平及成骨效应明显下降;③加入细胞外调节蛋白激酶磷酸化抑制剂处理的野生型及黏着斑激酶敲除后,小鼠胚胎成纤维细胞与对照组相比成骨相关蛋白表达水平及成骨效应明显下降;④提示静默黏着斑激酶表达可通过降低磷脂酰肌醇3-激酶、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶、细胞外调节蛋白激酶(1/2)磷酸化水平,降低成骨相关蛋白表达水平,进而抑制小鼠胚胎成纤维细胞成骨分化.
关键词：黏着斑激酶永生化小鼠胚胎成纤维细胞细胞外调节蛋白激酶成骨分化
分类号：R459.9(治疗学)R318(医用一般科学)Q254(细胞生理学)
论文发表日期：2021-01-11
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 165-171 )
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