tTA/tetO-CCKR-2双转基因模型小鼠鉴定及生存时间分析
高子清1
阮思蓓2
李丽1
凌凤2
唐晓琴2
康清梅2
罗斯译2
罗静2
唐亚平3
唐明希2
1.西南医科大学,四川省泸州市 6460002.西南医科大学附属医院病理科,四川省泸州市 6460003.西南医科大学神经生物教研室,四川省泸州市 646000;广州市妇女儿童医疗中心, 广东省广州市 510000
摘要：背景:前脑特异性胆囊收缩素受体2(CCKR-2)双转基因小鼠(tTA/tetO-CCKR-2 tg,简称dtg)是焦虑相关疾病的理想动物模型,但尚缺乏该模型鉴定及寿命相关数据.目的:鉴定dtg小鼠子代DNA及胆囊收缩素受体2转基因前脑特异性表达并分析其生存情况.方法:由α-CaMKII/tTA单转基因小鼠和tetO-CCKR-2单转基因小鼠杂交,构建tTA/tetO-CCKR-2双转基因小鼠模型,取子代鼠尾提取DNA进行基因型鉴定;以野生型小鼠(WT小鼠)做对照,原位杂交特异性识别前脑胆囊收缩素受体2转基因表达;记录2年内dtg和WT小鼠(雌、雄分别各30只)的自然寿命进行生存分析.实验方案经西南医科大学实验动物伦理委员会批准;伦理审批号:20150068.结果与结论:①基因型鉴定:dtg实验小鼠预期基因片段大小与琼脂糖凝胶电泳结果相符;②原位杂交鉴定:dtg小鼠前脑区域呈现强烈的胆囊收缩素受体2杂交信号,而WT小鼠几乎未呈现;③寿命观察:雌、雄dtg小鼠中位生存时间分别为76周和77周,生存率均随小鼠的年龄增长而降低,且均分别显著低于雌、雄WT小鼠(均P＜0.001);不同性别dtg小鼠间生存率差异无显著性意义(P=0.577);④结果表明,dtg小鼠可通过鼠尾提取DNA、PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳鉴定基因型及原位杂交鉴定胆囊收缩素受体2转基因在前脑特异性表达;tTA/tetO-CCKR-2双转基因诱导可能会缩短小鼠的总体寿命,但对雌、雄dtg小鼠间的影响无显著差异.
关键词：双转基因小鼠基因型鉴定原位杂交生存分析焦虑症恐惧行为应激障碍
分类号：R446(诊断学)R496(康复医学)R318(医用一般科学)
资助基金：四川省科技厅科技支撑计划(14ZC0054)泸州市科知局-西南医科大学联合资助项目(2017LZXNYD-J14)
论文发表日期：2021-04-11
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1682-1687 )
英文信息