孟鲁司特联合骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤模型大鼠

孙建威; 杨新明; 张瑛

摘要：背景:联合多种治疗手段能够针对不同靶点进行有效干预,发挥协同或叠加效应,已成为当今临床治疗脊髓损伤的新理念.目的:探讨孟鲁司特联合骨髓间充质干细胞移植对脊髓损伤大鼠神经功能恢复的作用.方法:60只8周龄健康雄性SD大鼠随机分为4组,每组15只,分别为模型组、孟鲁司特组、骨髓间充质干细胞组、联合组.各组均按照Allen法进行脊髓损伤造模,在造模成功后1,6 h,通过灌胃给予孟鲁司特5 mg/kg或等量生理盐水,之后1次/d,连用30 d,造模后2 h在脊髓损伤区域一次性注入1μL BrdU标记的骨髓间充质干细胞悬液或等量PBS.造模后1,3,7,14,21,30 d,应用BBB评分和Rivlin斜板实验进行大鼠后肢运动功能评价;造模后7 d,采用苏木精-伊红染色和Nissl染色观察大鼠脊髓组织病理学变化;采用免疫组化法检测大鼠脊髓组织胶质纤维酸性蛋白、白细胞介素1β的表达以及BrdU阳性标记率;采用Western blot法检测大鼠脊髓组织中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达.结果与结论:①造模后7,14,21,30 d,联合组、孟鲁司特组、骨髓间充质干细胞组BBB评分和Rivlin斜板实验结果明显好于模型组(P<0.05);②造模后7 d,联合组、孟鲁司特组、骨髓间充质干细胞组炎性反应及水肿减轻,损伤空洞面积和胶质瘢痕面积减小,损害节段结构改善;③造模后7 d,联合组、孟鲁司特组、骨髓间充质干细胞组胶质纤维酸性蛋白、白细胞介素1β表达明显低于模型组(P<0.05),联合组BrdU阳性率高于骨髓间充质干细胞组(P=0.000);④造模后7 d,联合组、孟鲁司特组、骨髓间充质干细胞组Bax和Caspase-3的表达显著低于模型组(P<0.05),Bcl-2的表达显著高于模型组(P<0.05);⑤联合组上述所有指标均优于孟鲁司特组、骨髓间充质干细胞组;⑥结果表明,孟鲁司特联合骨髓间充质干细胞移植能够显著改善脊髓损伤大鼠神经运动功能,其机制可能与抑制局部炎性反应及胶质细胞增生、减少凋亡相关蛋白的表达、提高骨髓间充质干细胞移植成活率有关.