比较人不同细胞来源诱导多能干细胞与胚胎干细胞拟胚体的分化培养过程
韦云剑1
张风波2
龙平1
江欣星1
马燕琳1
孙菲3
李崎1
1.海南医学院第一附属医院海南省人类生殖与遗传重点实验室,生殖医学科,海南省地方病(地中海贫血)临床医学研究中心,海南省海口市 570102;海南医学院热带转化医学教育部重点实验室,海南省海口市 570102;海南医学院第一附属医院海口市人类遗传资源保藏重点实验室,海南省海口市 5701022.海南医学院第一附属医院海南省人类生殖与遗传重点实验室,生殖医学科,海南省地方病(地中海贫血)临床医学研究中心,海南省海口市 570102;海南医学院热带转化医学教育部重点实验室,海南省海口市 570102;海南医学院第一附属医院海口市人类遗传资源保藏重点实验室,海南省海口市 570102;安徽省妇幼保健院产科,安徽省合肥市 2300003.海南医学院第一附属医院海南省人类生殖与遗传重点实验室,生殖医学科,海南省地方病(地中海贫血)临床医学研究中心,海南省海口市 570102;海南医学院热带转化医学教育部重点实验室,海南省海口市 570102;海南医学院第一附属医院海口市人类遗传资源保藏重点实验室,海南省海口市 570102;南方医科大学南方医院妇产科,广东省广州市 510515
摘要：背景:通过小分子化合物、质粒转染等方法可成功诱导出无病毒载体整合的诱导多能干细胞.与胚胎干细胞相似,诱导多能干细胞可向造血祖细胞进行自由分化,但外源性因子的转入及不同来源人体细胞是否对诱导多能干细胞的分化及诱导造血祖细胞产生影响,目前尚未清楚.目的:比较人不同细胞来源诱导多能干细胞和胚胎干细胞拟胚体的基因表达差异,为诱导多能干细胞的临床转化进行探索.方法:分别选用羊水细胞及尿细胞来源诱导多能干细胞和人胚胎干细胞进行诱导分化.收集分化不同时间点的拟胚体,检测多能性基因Oct4、Sox2、Nanog以及内胚层标记基因GATA4、中胚层标记基因MSX1、外胚层标记基因PAX6、造血干细胞标记基因CD34和CD43的表达.结果与结论:①羊水细胞来源诱导多能干细胞拟胚体在培养第8天检测不到Oct4、Sox2、Nanog表达,尿细胞来源诱导多能干细胞和胚胎干细胞拟胚体可维持表达至第16天;②羊水细胞来源诱导多能干细胞拟胚体中GATA4、MSX1、PAX6表达量峰值出现在第4天,持续表达到第8-12天,而其他2种细胞拟胚体中GATA4、MSX1、PAX6表达量峰值出现在第4-8天,并且可持续表达至第12-16天;三胚层标记基因在尿细胞来源诱导多能干细胞拟胚体中的表达量明显高于其他2种细胞拟胚体;③在羊水细胞、尿细胞来源诱导多能干细胞拟胚体中造血干细胞比率在第12天达峰值,而胚胎干细胞拟胚体中造血干细胞比率在第4天达峰值,尿细胞来源诱导多能干细胞拟胚体中造血干细胞比率高于其他2种细胞拟胚体;④人不同细胞来源诱导多能干细胞及胚胎干细胞拟胚体分化培养过程中均具有全能性及三胚层分化能力但各具特点.尿细胞来源诱导多能干细胞或许更适合替代胚胎干细胞成为体外研究造血细胞分化的模型.
关键词：干细胞诱导多能干细胞胚胎干细胞拟胚体多能性造血分化造血干细胞羊水细胞尿细胞
分类号：R459.9(治疗学)R394.2(医学遗传学)Q813.1+1(细胞工程)
资助基金：海南省重大科技项目(ZDKJ2017007)海南省自然科学基金(2019CXTD408)国家自然科学基金(81960283)国家自然科学基金(81660433)国家自然科学基金(81460034)国家自然科学基金(81460236)
论文发表日期：2021-09-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 4019-4024 )
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