补肾健脾活血方含药血清干预过表达、沉默Beclin-1基因的MC-3T3-E1细胞增殖及碱性磷酸酶活性
郑维蓬1
胡伟坚2
赵国源2
魏合伟1
刘治军1
万雷1
陈胜1
廖志浩1
1.广州中医药大学第三附属医院,广东省广州市 5103752.广州中医药大学,广东省广州市 510006
摘要：背景:成骨细胞是参与骨代谢动态平衡精细调节的重要细胞之一,其功能异常在骨质疏松症发病中极其重要.研究发现自噬基因Beclin-1敲除导致成骨细胞分化和矿化能力下降,提示Beclin-1在骨代谢中具有重要调控作用.目的:补肾健脾活血方含药血清对过表达、沉默Beclin-1基因的MC-3T3-E1细胞增殖及碱性磷酸酶活性的影响.方法:构建Beclin-1过表达及沉默重组慢病毒载体,制备补肾健脾活血方含药血清.将MC-3T3-E1成骨细胞分成6组,分别为空白血清+空病毒组、空白血清+Beclin-1过表达组、空白血清+Beclin-1沉默组、含药血清+空病毒组、含药血清+Beclin-1过表达组、含药血清+Beclin-1沉默组;根据组别不同进行干预,CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期,碱性磷酸酶试剂盒检测碱性磷酸酶活性.结果 与结论:①与空白血清+空病毒组比较,含药血清+空病毒组、空白血清+Beclin-1过表达组及含药血清+Beclin-1过表达组的细胞增殖能力和碱性磷酸酶活性均显著增强,空白血清+Beclin-1沉默组、含药血清+Beclin-1沉默组的细胞增殖能力和碱性磷酸酶活性均降低,其中含药血清+Beclin-1过表达组、空白血清+Beclin-1沉默组的变化最明显;②空白血清+Beclin-1过表达组和含药血清+Beclin-1过表达组处于G2/M期的细胞比例较高;空白血清+空病毒组、空白血清+Beclin-1沉默组和含药血清+Beclin-1沉默组处于G0/G1期的细胞比例较高;空白血清+Beclin-1过表达组和含药血清+空病毒组处于S期的细胞比例较高;③结果 表明,过表达Beclin-1、补肾健脾活血方含药血清可提高MC-3T3-E1细胞增殖能力及碱性磷酸酶活性,尤其二者同时干预时作用最强,而沉默Beclin-1则降低MC-3T3-E1细胞增殖能力及碱性磷酸酶活性,补肾健脾方含药血清在某种程度上可抑制Beclin-1沉默的不良影响.
关键词：MC-3T3-E1细胞慢病毒转染Beclin-1自噬中药碱性磷酸酶
分类号：R459.9(治疗学)R318(医用一般科学)R274.9(中医骨伤科学)
资助基金：广东省中医药局科研项目(20191178)广东省中医药局科研项目(20203011)
论文发表日期：2021-10-11
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 4650-4655 )
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