不同浓度富血小板血浆修复兔膝骨关节炎软骨缺损的比较

房昕; 郭金铭; 刘品端

摘要：背景:体内和体外的研究均表明,富血小板血浆对促进软骨细胞增殖和组织再生修复起重要作用,但对于不同浓度富血小板血浆修复兔膝骨关节炎软骨缺损的研究较少.目的:比较不同浓度富血小板血浆修复兔膝骨关节炎软骨缺损的效果,为临床治疗膝骨关节炎软骨损伤提供理论依据和选择方案.方法:50只健康新西兰大白兔随机被分为空白组、模型组、富血小板血浆低浓度、中浓度、高浓度组,每组10只.二次离心法制备富血小板血浆.除空白组以外,各组采用改良Hulth法制备兔膝骨关节炎模型.模型组在关节腔注射0.3 mL生理盐水,富血小板血浆低浓度、中浓度、高浓度组分别注射浓度为(1.0-1.2)×1012L-1、(1.5-1.7)×1012L-1、(2.0-2.2)×1012L-1的富血小板血浆.采用ELISA法检测关节液中相关炎症因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6的表达;苏木精-伊红染色、甲苯胺蓝染色和Mankin's病理评分来评估不同浓度富血小板血浆修复膝骨关节炎软骨缺损后的组织学变化;Western blot和RT-PCR检测关节软骨组织中Ⅱ型胶原蛋白和聚集蛋白聚糖的蛋白及mRNA表达水平.实验方案经中国医科大学动物实验动物福利与伦理委员会批准.结果与结论:①与模型组比较,富血小板血浆各浓度组相关炎症因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6的水平均有所下降(P＜0.05),中浓度组表达水平少于低浓度组和高浓度组(P＜0.05);②苏木精-伊红和甲苯胺蓝染色结果显示,富血小板血浆低浓度组和高浓度组软骨细胞形态较规则,数量有所增加,中浓度组软骨细胞排列较整齐,有软骨样细胞形成,软骨细胞修复效果明显;③Mankin's病理评分结果,模型组最高,其次富血小板血浆低浓度和高浓度组,中浓度组评分最低;④Western blot和RT-PCR结果显示,与模型组比较,富血小板血浆各浓度组软骨组织中Ⅱ型胶原蛋白和聚集蛋白聚糖蛋白和mRNA表达水平明显增加(P＜0.05),中浓度组表达明显高于低浓度组和高浓度组(P＜0.05);⑤结果说明,不同浓度富血小板血浆均能有效抑制兔膝骨关节炎过程中相关炎症因子的表达,对膝骨关节炎软骨缺损有明显修复作用,以(1.5-1.7)x1012L-1浓度富血小板血浆修复效果更理想.