DNA拓扑异构酶Ⅱ在ICR小鼠神经干细胞中的表达及意义
孙孟军1
郭建美2
周更苏3
董泽飞4
郑春贵3
曹翠丽5
1.邢台医学高等专科学校,公共教学部,河北省邢台市 0540002.邢台医学高等专科学校,基础医学部,河北省邢台市 0540003.邢台医学高等专科学校,护理系,河北省邢台市 0540004.邢台医学高等专科学校,口腔医学系,河北省邢台市 0540005.河北医科大学基础医学院神经生物研究室,河北省石家庄市 050017
摘要：背景:胚胎期的神经干细胞可向神经元和神经胶质细胞分化,而实际应用中希望神经干细胞更多地分化成神经元.因此,研究神经干细胞向神经元的定向分化机制至关重要.DNA拓扑异构酶Ⅱ是一类广泛存在于生物体内的核蛋白,在DNA复制、修复、转录、重组以及染色体分离等生命活动中发挥重要作用.目的:探讨神经干细胞及其向神经元定向分化过程中DNA拓扑异构酶Ⅱ的表达及意义.方法:从ICR小鼠(E12.5 d)大脑皮质中分离培养神经干细胞,将神经干细胞球消化成单细胞后,以5×108 L-1密度接种于用Matrigel铺底的培养皿上,加入含B27、N2、10μg/L胶质细胞源性神经营养因子的成神经诱导分化条件培养液,诱导培养1,2,3 d采用免疫细胞化学、Western blot、实时定量PCR检测DNA拓扑异构酶Ⅱα和β的表达.结果 与结论:①DNA拓扑异构酶Ⅱα阳性细胞在神经球内数量较多,且均匀分布,在向神经元诱导分化后阳性细胞有所减少;DNA拓扑异构酶Ⅱβ阳性细胞在神经球内数量较少,主要分布在神经球中央,在向神经元诱导分化后强表达的阳性细胞开始增多,在诱导分化2 d达到高峰,之后呈减少趋势;②在神经球中DNA拓扑异构酶Ⅱα蛋白和mRNA表达较高,在向神经元诱导分化后逐渐降低;在神经球中DNA拓扑异构酶Ⅱβ蛋白和mRNA表达较低,在向神经元诱导分化后显著增高;③通过实验得出DNA拓扑异构酶Ⅱβ参与神经干细胞向神经元的定向分化.
关键词：神经干细胞TopoⅡαTopoⅡβ免疫细胞化学免疫印迹实时定量PCR
分类号：R459.9(治疗学)R394.26(医学遗传学)R318(医用一般科学)
资助基金：河北省卫健委重点科技研究计划(20200168)
论文发表日期：2022-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 84-89 )
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