miR-373下调转化生长因子βⅡ型受体表达抑制肝星状细胞活化
徐静1
严永敏2
蔡梦洁3
1.江苏大学附属医院检验科,江苏省镇江市 2120132.江苏大学医学院,江苏省镇江市 2120133.江苏大学医学院,江苏省镇江市 212013;苏州大学附属第一医院,江苏省血液研究所,江苏省苏州市 215006
摘要：背景:肝星状细胞活化分泌大量胶原是肝纤维化进展的主要因素,miRNA在肝星状细胞活化、凋亡等方面发挥着重要作用,miR-373调控肝星状细胞胶原分泌的作用及机制尚不清楚.目的:探讨miR-373靶向调控转化生长因子βⅡ型受体在肝星状细胞胶原分泌中的作用.方法:①建立Bal b/c小鼠肝纤维化模型,Masson法测定肝组织胶原,采集小鼠血清样本,提取血清总RNA,qRT-PCR定量分析小鼠mmu-miR-291a-3p(人hsa-miR-373-3p的同源序列)水平.免疫组化检测肝组织转化生长因子βⅡ型受体和αSMA表达;②TargetScan软件预测miR-373的靶基因转化生长因子βⅡ型受体,采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-373调控转化生长因子βⅡ型受体启动子的活性;③用25,50 nmol/L miR-373 mimics转染人肝星状细胞(LX-2)过表达miR-373,并以转染随机miRNA序列做对照,采用Western blot和免疫荧光检测转化生长因子βⅡ型受体和成纤维细胞激活蛋白的蛋白表达.实验方案经江苏大学实验动物伦理委员会批准(批准号为UJS-IACUC-AP-2020033127).结果 与结论:①健康对照组相比,肝纤维化组小鼠血清mmu-miR-291a-3p水平明显降低(P<0.001),肝组织胶原合成显著增加;②肝纤维化组织转化生长因子βⅡ型受体和αSMA共表达显著增加;③miR-373显著抑制了转化生长因子βⅡ型受体启动子的活性(P<0.01),miR-373过表达显著抑制LX-2的转化生长因子βⅡ型受体(P<0.05)和成纤维细胞激活蛋白(P<0.01)的蛋白表达;④结果说明,miR-373通过调控转化生长因子βⅡ型受体表达抑制肝星状细胞活化和肝组织胶原沉积.
关键词：肝纤维化miRNAmiR-373转化生长因子βⅡ型受体TGFβR2
分类号：R446(诊断学)R496(康复医学)R318(医用一般科学)
资助基金：国家自然科学基金(81670549)
论文发表日期：2022-02-11
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 756-761 )
英文信息