5-氮胞苷联合骨形态发生蛋白2诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化
王文华1
刘洋2
王巧敏1
吕洋2
赵亚如1
王海萍2
1.河北北方学院基础医学院组织学与胚胎学教研室,河北省张家口市 075000;河北北方学院干细胞与生殖生物学实验室,河北省张家口市 0750002.河北北方学院干细胞与生殖生物学实验室,河北省张家口市 075000
摘要:背景:干细胞已成为组织工程中理想的种子细胞,为细胞移植治疗心肌梗死提供了研究方向.目的:探讨骨形态发生蛋白2联合5-氮胞苷体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的可行性.方法:采用全骨髓贴壁法培养骨髓间充质干细胞,将第3代骨髓间充质干细胞进行分组诱导,分别为对照组(普通IMDM培养基)、骨形态发生蛋白2组(200 ng/L)、5-氮胞苷组(10μmol/L)、5-氮胞苷+骨形态发生蛋白2组.诱导3 d后更换正常培养基继续培养4周,免疫细胞化学法检测cTnI的表达,免疫荧光化学法检测Desmin、cTnT的表达,Western blot检测cTnT和cTnI的表达;诱导3 d后更换正常培养基继续培养1,2,4周,采用RT-qPCR检测心肌早期转录因子GATA-4、Nkx2.5 mRNA的表达.结果 与结论:①Western blot检测诱导组均表达cTnT、cTnI,联合诱导组cTnT、cTnI的表达高于单独诱导组(P<0.01);②免疫细胞化学法检测诱导组cTnI均呈阳性表达,联合诱导组高于单独诱导组(P<0.05);免疫荧光细胞化学法检测诱导组Desmin、cTnT均呈阳性表达,联合诱导组高于单独诱导组(P<0.05);③RT-qPCR检测诱导组均有GATA-4、Nkx2.5 mRNA的表达,联合诱导组高于单独诱导组(P<0.05);④结果表明,骨髓间充质干细胞经5-氮胞苷和骨形态发生蛋白2联合诱导后可以提高心肌样细胞的分化效率.
关键词:干细胞骨髓间充质干细胞心肌样细胞骨形态发生蛋白25-氮胞苷SD大鼠
分类号:R459.9(治疗学)R394.2(医学遗传学)R329.2(人体形态学)
资助基金:河北省自然科学基金(C2019405091)河北省高等学校科学技术研究项目(ZD2019066)
论文发表日期:2022-07-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 2958-2963 )
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