两种方法提取人脐带间充质干细胞三维培养生物学特性的比较
陈思铭
胡加伟
李丽丽
伍永强
彭维杰
赣南医学院,江西省赣州市 341000
摘要：背景:人脐带间充质干细胞提取方法主要有酶消化法和组织块贴壁法,明确两种方法提取的细胞在二维、三维培养下的生物学特性,对组织工程中种子细胞提取方法及培养方式的选择具有重要意义.目的:比较酶消化法和组织块贴壁法提取的人脐带间充质干细胞在二维、三维培养下的生物学特性.方法:酶消化法和组织块贴壁法分离人脐带间充质干细胞,扩增培养至第3代进行二维、三维培养;扫描电镜观察细胞球表征;死活染色观察细胞球存活情况;Alamar Blue检测细胞增殖能力;流式细胞术检测免疫表型CD34、CD44、CD45、CD90、CD105的表达;免疫荧光、免疫印迹检测多能性转录因子Sox2、Nanog、Oct4表达.结果 与结论:①酶消化法比组织块贴壁法获取细胞时间更短,二维培养下组织块贴壁法的细胞增殖能力优于酶消化法,但在三维培养条件下细胞增殖缓慢且无差异.三维培养3 d后细胞成紧密球体,存活良好.②两种方法提取的细胞在二维、三维培养条件下均表达CD44、CD90、CD105,不表达CD34、CD45.二维培养下,酶消化法提取细胞的CD105表达高于组织块贴壁法;三维培养下,酶消化法提取细胞的CD90、CD105表达也高于组织块贴壁法.③二维和三维培养下两种方法提取细胞均表达多能性转录因子Sox2、Nanog、Oct4.二维培养下,酶消化法提取细胞3个转录因子表达均高于组织块贴壁法;但三维培养下,组织块贴壁法提取细胞Sox2的表达高于酶消化法,Nanog、Oct4的表达两组间无差异.
关键词：干细胞脐带间充质干细胞三维培养细胞球生物学特性免疫表型转录因子
分类号：R459.9(治疗学)R318(医用一般科学)Q813.1+1(细胞工程)
资助基金：国家自然科学基金(81860327)
论文发表日期：2022-07-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 2997-3003 )
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