受损脊髓神经轴突再生过程中Nogo-A/NgR及NGF/TrkA信号通路的交互作用

杨林; 邬瑶; 周宾宾

摘要：背景:生长相关蛋白43是一种胞膜类磷酸蛋白,是神经元再生可塑性的标志蛋白,参与轴突新生与各阶段联系发生的关键过程,对于中枢神经再生具有重要意义.目的:通过观察Nogo-A/NgR信号通路及NGF/TrkA信号通路的交互作用对生长相关蛋白43表达的影响,探讨脊髓损伤后神经再生恢复机制.方法:将120只SD大鼠随机分为5组:NgR阻断组、TrkA阻断组、双阻断剂组、损伤对照组和假手术组.假手术组大鼠进行椎板切除术(不损伤脊髓);其余各组建立脊髓损伤大鼠模型.造模成功后立即注射阻断剂,NgR阻断组大鼠在脊髓损伤后的损伤节段注射25μL NgR阻断剂NEP1-40和25μL生理盐水;TrkA阻断组大鼠在相应部位注射25μL TrkA阻断剂K252a和25μL生理盐水;双阻断剂组大鼠相应部位注射25μL NgR阻断剂NEP1-40和25μL TrkA阻断剂K252a;损伤对照组和假手术组大鼠注射50μL生理盐水.于干预后3,7,14,21 d分别取大鼠脊髓组织,通过免疫组织化学、PCR和Western blot检测大鼠脊髓组织生长相关蛋白43的mRNA及蛋白表达.结果与结论:①免疫组化、PCR及Western blot结果显示,NgR阻断组、TrkA阻断组、双阻断剂组、损伤对照组的生长相关蛋白43 mRNA及蛋白表达水平较假手术组提高;NgR阻断组、双阻断剂组的生长相关蛋白43 mRNA及蛋白表达水平较损伤对照组高,在第7,14天差异有显著性意义(P<0.05或<0.01);TrkA阻断组的生长相关蛋白43 mRNA及蛋白表达水平较损伤对照组降低,在第7,14天差异有显著性意义(P<0.05或<0.01);②结果表明,NgR阻断证明Nogo-A/NgR信号通路可显著提升生长相关蛋白43的表达,促进神经轴突的再生;TrkA阻断证明NGF/TrkA信号通路可降低生长相关蛋白43的表达,抑制神经轴突的再生;NgR和TrkA双阻断结果显示Nogo-A/NgR信号通路及NGF/TrkA信号通路的交互作用可促进生长相关蛋白43的表达.