聚多巴胺修饰蚯蚓血红蛋白纳米氧载体的构建及性能检测
杨康1
赵会民2
樊毫军3
苏谐4
伍国俊5
1.广西医科大学第二附属医院,急诊科,广西壮族自治区南宁市 5300072.广西医科大学第二附属医院创伤中心,广西壮族自治区南宁市 5300073.天津大学应急医学研究院,天津市 3000724.广西医科大学第二附属医院血液内科,广西壮族自治区南宁市 5300075.广西重点急危重症医学实验室,广西壮族自治区南宁市 530007
摘要：背景:蚯蚓血红蛋白分子稳定性和血管毒性反应优于哺乳动物血红蛋白,聚多巴胺改性可能进一步发挥其作为血红蛋白氧载体的优势,目前国内外尚未报道.目的:制备聚多巴胺修饰蚯蚓血红蛋白纳米氧载体,并检测其性能.方法:从赤子爱胜蚓分离提纯血红蛋白,以牛血红蛋白为对照,分别与盐酸多巴胺按1:2质量比在pH=8.5-8.8条件下完成修饰改性,分别构建聚多巴胺表面修饰蚯蚓血红蛋白纳米微粒(PDA-HrNPs)与聚多巴胺表面修饰牛血红蛋白纳米微粒(PDA-BHbNPs),检测PDA-HrNPs的纳米微粒直径、离散度、Z电位、功能基团结构、P50及Hill系数.将不同质量浓度[0(正常对照),1.0,2.5,4.0,5.5 g/L]的两组纳米微粒分别与血管内皮细胞或巨噬细胞共培养,培养6,12,24 h后,检测巨噬细胞存活率;培养24 h后,检测血管内皮细胞存活率及培养液中NO浓度.结果 与结论:①蚯蚓血红蛋白经聚多巴胺修饰后,红外光谱显示酰胺键谱带Ⅰ与Ⅱ持续存在,在800-1000 cm-1之间出现聚多巴胺与血红蛋白分子交联生成的新基团谱带,粒径(202.2±13.64)nm,分散指数为0.22±0.05,Z电位(1.28±0.87)mV,P50为(1.44±0.02)kPa,Hill系数1.58±0.02;②两种纳米微粒培养的巨噬细胞存活率均低于正常对照组(P<0.05),随着培养时间的延长,两种纳米微粒培养的巨噬细胞存活率下降;相同质量浓度下(2.5,4.0,5.5 g/L),PDA-HrNPs组培养6 h后的巨噬细胞存活率高于PDA-BHbNPs组(P<0.05);③培养24 h后,随着纳米微粒质量浓度的增加,两种纳米微粒培养的血管内皮细胞的存活率与培养液NO浓度下降,相同质量浓度下两种纳米微粒培养细胞的存活率与培养液NO浓度比较差异均无显著性意义(P>0.05);④结果表明,聚多巴胺蚯蚓血红蛋白纳米微粒在体外具有良好的携氧活性与安全性,抗吞噬性能优于聚多巴胺修饰牛血红蛋白纳米微粒.
关键词：红细胞替代物血红蛋白载体蚯蚓血红蛋白化学修饰纳米微粒细胞学实验
分类号：R457.1(治疗学)R318(医用一般科学)R-331(实验医学、医学实验)
资助基金：国家重点研发计划(2018YFC1504402-02)广西医科大学第二附属医院基金项目(EFYKY2020010)
论文发表日期：2022-07-21
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 3369-3374 )
英文信息