一株永生化口腔癌相关成纤维细胞系的建立及鉴定
陈盛1
杨艳1
丁亮2
叶传进1
张磊1
夏舒1
李慧玲1
黄晓峰1
1.南京大学医学院附属口腔医院,病理科,江苏省南京市 2100002.南京大学医学院附属口腔医院,中心实验室,江苏省南京市 210000
摘要：背景:肿瘤相关成纤维细胞系是构成肿瘤微环境的重要细胞成分,但是在原代培养过程中极易老化和表型丢失,进而显著降低肿瘤相关成纤维细胞功能相关研究的实验重复性.目的:旨在建立一种永生化的口腔癌相关成纤维细胞系,为探索口腔癌中肿瘤相关成纤维细胞功能提供稳定的细胞实验材料.方法:采用酶消化法分离、纯化人口腔癌组织来源肿瘤相关成纤维细胞,利用包装有人端粒酶反转录酶(pBABE-hygro-hTERT)的慢病毒感染原代肿瘤相关成纤维细胞,鉴定其形态及其标志物,然后进行细胞增殖、衰老功能检测,对原代和永生化肿瘤相关成纤维细胞进行染色体核型分析、细胞系身份鉴定.结果 与结论:①成纤维细胞永生化后,其标志物α-SMA、PDGFRβ以及FSP-1表达没有发现显著改变;②即使在传代15代后,永生化成纤维细胞的增殖速率明显优于非永生化成纤维细胞;③β-半乳糖苷酶染色结果显示:随着细胞代数增加,与非永生化成纤维细胞相比,永生化成纤维细胞未见明显衰老;④永生化成纤维细胞染色体核型仍保留正常细胞的基本特征,而未发生恶性转化;⑤短串联重复序列鉴定结果显示,永生化成纤维细胞为原代细胞,与已知细胞数据库信息均无重合;⑥以上结果说明,成功建立了口腔癌来源的永生化成纤维细胞系,为口腔癌肿瘤微环境研究提供进一步的实验基础.
关键词：肿瘤相关成纤维细胞口腔鳞癌原代细胞永生化细胞系细胞衰老染色体核型鉴定
分类号：R459.9(治疗学)R318(医用一般科学)R78(口腔科学)
资助基金：国家青年科学基金项目(81902754)江苏省自然科学基金(BK20190304)
论文发表日期：2022-08-21
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 3808-3813 )
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