上调滤泡调节性T细胞治疗肾移植抗体介导的排斥反应

徐媛; 牛玉林; 袁智辉; 贾磊; 潘光辉

摘要：背景:由抗体介导排斥反应引起的移植肾失功目前临床尚缺乏有效的治疗手段.有研究显示肾移植患者血浆miR-4286的表达显著上调,miR-4286可靶向下调转化生长因子β的表达而激活免疫反应.目的:探讨沉默miR-4286上调滤泡调节性T细胞治疗肾移植抗体介导排斥反应的作用及机制.方法:选择贵州医科大学附属医院接受肾移植的患者,纳入20例肾移植抗体介导排斥反应患者与20例免疫耐受患者,对两组活检肾组织进行苏木精-伊红染色与C4d免疫组化染色,检测两组患者外周血淋巴细胞miR-4286 mRNA的表达与滤泡辅助性、调节性T细胞比例.将排斥反应患者淋巴细胞分组处理,空白载体组、miR-4286过表达组、miR-4286沉默组、转化生长因子β阻断组(该组转染miR-4286抑制的慢病毒载体的同时加入转化生长因子β中和抗体),48 h后,检测B细胞、浆细胞和滤泡调节性T细胞的比例,以及细胞上清转化生长因子β、干扰素γ、白细胞介素6和白细胞介素21的水平.结果与结论:①苏木精-伊红染色显示,排斥反应组肾组织浸润的炎细胞数量高于免疫耐受组(P<0.05);免疫组化染色显示,排斥反应组肾组织可见大量C4d阳性的细胞,免疫耐受组未见C4d阳性细胞.②排斥反应组miR-4286 mRNA表达量、滤泡辅助性T细胞比例高于免疫耐受组(P<0.05),滤泡调节性T细胞比例低于免疫耐受组(P<0.05).Spearman相关分析显示,miR-4286表达与滤泡辅助性T细胞比例呈正相关,与滤泡调节性T细胞比例呈负相关.③与对照组比较,miR-4286过表达组转化生长因子β水平降低(P<0.05),干扰素γ、白细胞介素6、白细胞介素21水平升高(P<0.05);miR-4286沉默组转化生长因子β水平升高(P<0.05),干扰素γ、白细胞介素6、白细胞介素21水平降低(P<0.05).与miR-4286沉默组比较,转化生长因子β阻断组转化生长因子β水平降低(P<0.05),干扰素γ、白细胞介素6、白细胞介素21水平升高(P<0.05).④与对照组比较,miR-4286过表达组B细胞与浆细胞比例均升高(P<0.05),滤泡调节性T细胞比例降低(P<0.05);miR-4286沉默组B细胞与浆细胞比例均降低(P<0.05),滤泡调节性T细胞比例升高(P<0.05).与miR-4286沉默组比较,转化生长因子β阻断组B细胞与浆细胞比例均升高(P<0.05),滤泡调节性T细胞比例降低(P<0.05).⑤结果表明,miR-4286在肾移植抗体介导排斥反应患者外周血淋巴细胞中高表达,miR-4286沉默可通过转化生长因子β途径上调淋巴细胞中滤泡调节性T细胞比例,抑制体液免疫.