明胶-海藻酸盐复合微球与凝胶修复软骨损伤
蒋浩然1
高健明2
林万程1
李婷2
李获2
王鹏2
冯靖2
孟昊业2
彭江2
丁立祥3
1.北京大学第九临床医学院,首都医科大学附属北京世纪坛医院脊柱外科,北京市 100038;中国人民解放军骨科研究所,全军骨科战创伤重点实验室,骨科再生医学北京市重点实验室,北京市 1008532.中国人民解放军骨科研究所,全军骨科战创伤重点实验室,骨科再生医学北京市重点实验室,北京市 1008533.北京大学第九临床医学院,首都医科大学附属北京世纪坛医院脊柱外科,北京市 100038
摘要：背景:软骨损伤的微创治疗对于微载体的要求较高,需要其有较高的细胞相容性、较强的细胞黏附力、较好的力学性能与低免疫原性.同时,临床使用条件相比实验室更加苛刻,在微创或注射使用微载体时液态微载体要明显优于固态微载体.目的:制备一种全新的高分子有机微载体,以用于修复软骨缺损.方法:通过明胶与液体石蜡(W/O)混合搅拌的化学乳化法制备浓度为6％的明胶微球,冻干后用无水乙醇处理固定,再使用紫外交联法固定,电镜观察微球形态.配置浓度为7％的海藻酸钠凝胶,与明胶微球混合孵育2 h,制备明胶-海藻酸盐复合凝胶.将脂肪间充质干细胞悬液滴入明胶-海藻酸盐复合凝胶中孵育24 h,滴入5％CaCl2溶液中充分交联,制备含细胞明胶-海藻酸盐复合微球.采用CCK-8法检测无细胞明胶-海藻酸盐复合微球浸提液的细胞毒性;利用死活染色观察含细胞明胶-海藻酸盐复合微球的细胞活性;将约1 mL明胶-海藻酸盐复合凝胶吸入10 mL针管进行注射,对未注射与注射1,3次的凝胶进行光镜观察.结果 与结论:①扫描电镜下可见,明胶微球孔隙相对均一且表面有层次感,微球粒径大多分布在180-500μm之间;②死活染色显示,培养24 h含细胞明胶-海藻酸盐复合微球中的细胞生长良好,携带细胞数量多且分布均匀,培养1,3,7 d后的细胞活性均在90％以上;③CCK-8检测显示,无细胞明胶-海藻酸盐复合微球浸提液无明显的细胞毒性;④与未注射时相比,注射1,3次后明胶-海藻酸盐复合凝胶中的明胶微球形态无变化,显示明胶-海藻酸盐复合凝胶体力学性能良好;⑤结果表明,联合使用含细胞明胶-海藻酸盐复合微球及含细胞明胶-海藻酸盐复合凝胶可使凝胶发挥组织胶的作用,利于材料紧贴目标区域.
关键词：明胶海藻酸盐复合微球复合凝胶高分子有机材料化学乳化法细胞相容性光交联软骨
分类号：R459.9(治疗学)R322.7+2(人体形态学)R318.08(医用一般科学)
资助基金：北京市医院管理中心重点医学专业发展计划(ZYLX202135)
论文发表日期：2022-10-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 4452-4457 )
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