灵芝孢子保护糖尿病模型大鼠附睾及对自噬的影响

张欣; 马小茹; 薛晶文; 王芳芳; 吴岚; 李岳

摘要：背景:糖尿病引起的高血糖与男性生殖不育密切相关,灵芝孢子长期以来被认为具有抗衰老、改善血糖水平的功能.然而灵芝孢子对糖尿病附睾的保护作用机制未见详细报道.目的:探讨灵芝孢子对糖尿病附睾的保护作用机制.方法:雄性SD大鼠随机分为正常组(n=10)、高脂高糖组(n=10)和模型组(n=20).正常组正常喂养,高脂高糖组和模型组大鼠饲以高脂高糖饮食.模型组大鼠在高脂高糖饮食基础上腹腔注射链脲佐菌素30 mg/kg诱导糖尿病大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为糖尿病组和灵芝孢子组(n=10);其中灵芝孢子组大鼠灌胃灵芝孢子300 mg/(kg·d);高脂高糖组与糖尿病组大鼠灌胃等量生理盐水,持续饲以高脂高糖饮食,连续干预12周.称体质量,检测空腹血糖、超氧化物歧化酶活性及丙二醛水平,并检测精子畸形率;苏木精-伊红染色观察大鼠附睾结构变化,Western blot检测大鼠附睾组织裂解半胱氨酸蛋白酶3和beclin1、p62、LC3蛋白表达,免疫组织化学染色法检测大鼠附睾组织裂解半胱氨酸蛋白酶3和p62的蛋白表达.结果与结论:①灵芝孢子可显著恢复附睾功能,明显改善附睾组织病理结构,提高细胞自噬和抗氧化能力;②免疫组织化学染色结果显示,灵芝孢子组大鼠附睾组织p62和裂解半胱氨酸蛋白酶3免疫强度显著下降;③Western blot分析结果显示,与糖尿病组大鼠相比,灵芝孢子可显著上调大鼠附睾组织beclin1和LC3蛋白表达,降低p62和裂解半胱氨酸蛋白酶3的蛋白表达;④提示灵芝孢子可能通过诱导自噬,提高抗氧化能力和抑制细胞凋亡,对糖尿病大鼠附睾产生保护作用.