磷酸肌酸改性壳聚糖水凝胶干预大鼠骨髓源性巨噬细胞极化和炎症因子的表达
生卫北1
熊奡2
刘苏2
邓嘉鹏2
翁鉴2
于斐2
陈英奇2
曾晖2
1.潍坊医学院,山东省潍坊市 261053;北京大学深圳医院骨关节科,广东省深圳市 518036;骨科生物材料国家地方联合工程研究中心,广东省深圳市 5180362.北京大学深圳医院骨关节科,广东省深圳市 518036;骨科生物材料国家地方联合工程研究中心,广东省深圳市 518036
摘要：背景:巨噬细胞极化介导的炎症反应在骨关节炎、类风湿关节炎等慢性炎症性疾病中发挥着重要作用.磷酸肌酸改性壳聚糖水凝胶在组织修复中表现出良好的潜在应用前景,但该水凝胶对巨噬细胞极化与炎症因子表达的作用尚不清楚.目的:探究磷酸肌酸改性甲基丙烯酸酐化壳聚糖水凝胶对巨噬细胞极化和炎症因子表达的影响.方法:采用一步冻干法制备水溶性良好的磷酸肌酸改性甲基丙烯酸酐化壳聚糖,在低毒性引发剂及紫外光照下进一步制备水凝胶.提取SD大鼠骨髓源性巨噬细胞,培养7 d后分3组培养:对照组加入细胞完全培养基;脂多糖组加入含脂多糖的细胞完全培养基;壳聚糖水凝胶组加入冻干水凝胶样品与含脂多糖的细胞完全培养基.利用CCK-8法检测细胞活性,RT-PCR、ELISA、Western Blot和免疫荧光技术检测巨噬细胞极化及其炎症因子表达情况.结果 与结论:①CCK-8实验检测显示,培养1,3,5 d后,3组细胞活性比较差异无显著性意义(P>0.05);②Western Blot和免疫荧光染色结果表明,与对照组比较,脂多糖组培养1,3 d的M2型巨噬细胞表面标志物CD206蛋白表达下调(P<0.05),ARG1蛋白表达上调(P<0.05);与脂多糖组比较,壳聚糖水凝胶组培养3 d的CD206、ARG1蛋白表达均上调(P<0.05);③ELISA与RT-PCR检测结果显示,与对照组相比,脂多糖组培养1,3 d促炎因子白细胞介素1β、白细胞介素6的蛋白与mRNA表达增加(P<0.05);与脂多糖组比较,壳聚糖水凝胶组培养1,3 d白细胞介素1β、白细胞介素6的蛋白与mRNA表达均减少(P<0.05);④结果表明,磷酸肌酸改性甲基丙烯酸酐化壳聚糖水凝胶促进巨噬细胞M2型极化、抑制其促炎因子表达的作用,将来可能为免疫相关疾病提供潜在治疗手段.
关键词：壳聚糖水凝胶骨髓源性巨噬细胞极化炎症因子脂多糖
分类号：R459.9(治疗学)R318.08(医用一般科学)Q24(细胞形态学)
资助基金：国家自然科学基金(82172432)国家自然科学基金(82102568)国家自然科学基金(82001319)广东省基础与应用基础研究基金(2019A1515011290)骨科生物材料国家地方联合工程研究中心(XMHT20190204007)深圳市高水平医院建设基金(SZXK023)深圳市"三名"医学项目(SZSM201612092)深圳市研发项目(Z2021N054)
论文发表日期：2022-11-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 5040-5046 )
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