囊胚期玻璃化二次冷冻对小鼠胚胎组蛋白表观修饰及多能性基因表达的影响
王建武1
赵艳华2
李竞宇2
王加强1
1.东北农业大学生命科学学院,黑龙江省哈尔滨市 1500302.重庆市妇幼保健院人类胚胎工程重庆市重点实验室,重庆市 400013
摘要：背景:在辅助生殖工作中,玻璃化二次冷冻可以有效提高胚胎利用率.课题组前期研究结果显示,不同发育时期的玻璃化二次冷冻显著影响胚胎发育,但其机制尚不明确.目的:探讨不同时期玻璃化二次冷冻影响胚胎发育潜力的可能机制.方法:收集ICR小鼠体内受精的2-细胞胚胎并进行体外培养,随机分为4组:对照组、8-细胞冷冻一次组(8C)、8-细胞冷冻一次解冻后于8-细胞期(8C-8C)或培养至囊胚期(8C-BL)再次冷冻.利用免疫荧光分析囊胚期H3K4me3、H3K9me2及H3K9AC的表达水平;实时荧光定量PCR分析多能性基因Cdx2、Oct4及Sox2的转录水平.结果 与结论:①免疫荧光结果显示,一次和二次冷冻均会导致囊胚期H3K9me2(P<0.01)及H3K9AC水平显著上升(P<0.0001);②一次冷冻不影响H3K4me3水平,但二次冷冻组H3K4me3水平显著下降,且在8C-BL组下降尤为严重(P<0.0001);③实时荧光定量PCR结果显示,一次冷冻及8-细胞期二次冷冻不会影响胚胎多能性基因Cdx2、Oct4和Sox2的表达水平,但8C-BL组胚胎多能性基因表达水平显著改变,Oct4的表达水平显著下降(P<0.01),而Cdx2(P<0.001)和Sox2(P<0.01)的表达水平显著上升;④结果表明,玻璃化二次冷冻对小鼠胚胎的表观遗传具有一定的负面影响,且囊胚期二次冷冻显著影响H3K4me3修饰及多能性相关基因表达水平.
关键词：早期胚胎二次冷冻小鼠辅助生殖组蛋白表观遗传多能性基因
分类号：R459.9(治疗学)R318(医用一般科学)Q813.7(细胞工程)
资助基金：国家自然科学基金(31970588)重庆市科卫联合医学科研项目(2021MSXM072)
论文发表日期：2022-11-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 5047-5052 )
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