鼻阻塞模型大鼠下颌骨自噬水平的变化

徐怡馨; 王一鑫; 李永明

摘要：背景:低氧状态下细胞自噬状态易被激活,而自噬水平对骨代谢的调控作用已经被证明.睡眠呼吸暂停使机体处于间歇低氧状态,而睡眠呼吸暂停诱发的低氧是否影响下颌牙槽骨及牙周膜的自噬水平未见报道.目的:观察机体低氧状态下对大鼠下颌自噬水平的影响.方法:将30只1周龄雄性Wistar大鼠随机分为3组,每组10只,单侧鼻阻塞组、双侧鼻阻塞组分别构建幼年大鼠单侧及双侧鼻阻塞模型,麻醉30 min后用高频电刀电灼阻塞大鼠的左鼻孔,1周后同样方法阻塞双侧鼻阻塞组右侧鼻孔;对照组不处理鼻孔.单侧鼻阻塞建模成功4周后,模型大鼠5周龄时麻醉处死取下颌骨,制备下颌第一磨牙牙周骨组织切片,进行苏木精-伊红染色和LC3免疫组化染色,利用Image-J图像分析系统对染色后的切片做定位定量分析.Western blot法检测下颌牙槽骨缺氧标志蛋白低氧诱导因子1α、自噬相关蛋白p62的蛋白表达水平,以及自噬标志蛋白LC3亚型LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值.结果与结论:①苏木精-伊红染色显示,单侧鼻阻塞组、双侧鼻阻塞组模型大鼠下颌牙槽骨骨小梁排列混乱;②免疫组化结果显示,单侧鼻阻塞组、双侧鼻阻塞组下颌第一磨牙牙槽骨细胞及牙周膜细胞胞浆LC3表达升高,提示自噬主要发生在牙周膜及牙槽骨区;③Western blot结果显示,与对照组相比,单侧鼻阻塞组、双侧鼻阻塞组模型大鼠下颌牙槽骨组织低氧诱导因子1α蛋白的表达水平显著升高,p62蛋白的表达水平显著下降(P<0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著升高(P<0.05);而双侧鼻阻塞组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值较单侧鼻阻塞组稍下降(P>0.05);④提示大鼠单侧、双侧鼻阻塞导致的低氧使下颌低氧诱导因子1α蛋白的表达水平升高,下颌第一磨牙牙周膜及牙槽骨组织自噬水平升高,但自噬升高的水平并不与鼻阻塞的严重程度呈正相关.