过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1β对乳腺癌干细胞干性表达的调控
赵菊芬1
马荣2
曹佳2
于传扬1
陶翔1
王嘉2
王立斌2
1.宁夏医科大学临床医学院,宁夏回族自治区银川市 7500042.宁夏医科大学总医院生物芯片国家工程研究中心宁夏分中心,宁夏回族自治区银川 市 750004
摘要：背景:研究表明,过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1β(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1beta,PGC-1β)通过PI3K/AKT/mTOR信号通路影响乳腺癌细胞的增殖、迁移及凋亡.而PGC-1β能否通过PI3K/AKT/mTOR信号通路影响乳腺癌干细胞的干性及其影响机制还不清楚.目的:探究PGC-1β对乳腺癌干细胞干性的影响及调控机制.方法:将PGC-1β空载体、过表达载体(Lv-PGC-1β)、干扰载体(Sh-PGC-1β)分别转染乳腺肿瘤MCF-7细胞,荧光显微镜观察转染效果;qRT-PCR及Western blot验证慢病毒转染后PGC-1βmRNA和蛋白的相对表达.在干性培养基中分别培养未转染组、PGC-1β空载体组、PGC-1β过表达组及PGC-1β干扰组的MCF-7细胞使其成为乳腺癌干细胞,显微镜下观察并记录干细胞球体的形成过程,Western blot验证干性标志物(ABCG2、ALDH1、OCT4)、上皮-间充质转化标记物(E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin、Slug和ZEB1)及PI3K/AKT/mTOR通路核心蛋白的相对表达.结果 与结论:①MCF-7贴壁细胞经干性培养基培养形成了折光性好、中间密度高的致密球干细胞;②乳腺癌干细胞干性蛋白的表达明显高于其贴壁细胞(P<0.01);③与未转染组、空载体组相比,PGC-1β过表达组乳腺癌干细胞的形成时间缩短,细胞球体数目增多、球体直径增大(P<0.01),而PGC-1β干扰组细胞球体数目减少、球体直径减小(P<0.01);④PGC-1β过表达组干性相关蛋白的表达高于未转染组、空载体组(P<0.01),上皮-间充质转化相关蛋白E-Cadherin表达低于未转染组、空载体组(P<0.01),而N-Cadherin、Vimentin、Slug和ZEB1的表达高于未转染组、空载体组(P<0.01);PI3K/AKT/mTOR相关蛋白及其磷酸化相关蛋白表达高于未转染组、空载体组(P<0.01),PGC-1β干扰组结果则与PGC-1β过表达组相反;⑤结果提示,PGC-1β能够通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路影响乳腺癌干细胞上皮-间充质转化,从而促进乳腺癌干细胞的形成及干性相关标志物的表达.
关键词：PGC-1βMCF-7细胞乳腺癌干细胞干性转染上皮-间充质转化PI3K/AKT/mTOR信号通路成球实验
分类号：R459.9(治疗学)R394.2(医学遗传学)R318(医用一般科学)
资助基金：国家自然科学基金(81860470)宁夏高层次科技创新领军人才项目(KJT2019003)宁夏重点研发计划对外科技合作专项项目(2019BFH02012)
论文发表日期：2023-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 59-65 )
英文信息