循环牵张力作用下髓核外泌体对终板软骨细胞的影响
张伟业1
展嘉文2
朱立国3
王尚全2
陈明2
魏戌4
冯敏山5
于杰5
韩涛6
蔡楚豪1
周帅琪1
邵晨晨1
1.中国中医科学院附属望京医院,骨伤综合科,北京市 1001022.中国中医科学院附属望京医院,骨伤综合科,北京市 100102;中医正骨技术北京市重点实验室,北京市 1007003.中医正骨技术北京市重点实验室,北京市 100700;中国中医科学院附属望京医院,脊柱二科,北京市 1001024.中医正骨技术北京市重点实验室,北京市 100700;中国中医科学院附属望京医院,学术发展处,北京市 1001025.中国中医科学院附属望京医院,脊柱二科,北京市 100102;中国中医科学院附属望京医院,学术发展处,北京市 1001026.中国中医科学院附属望京医院,骨伤综合科,北京市 100102;中国中医科学院附属望京医院,学术发展处,北京市 100102
摘要：背景:终板软骨细胞在髓核-终板复杂的微环境中受到多种因素的调节,异常应力所引发的微环境改变对终板软骨细胞的影响尚需深入探究.目的:观察循环牵张力条件下髓核细胞外泌体的分泌情况,以及应力刺激髓核外泌体对终板软骨细胞的影响.方法:体外分离培养人腰椎髓核细胞,应用FX-5000T系统对髓核细胞进行循环牵张力加载,采用磁珠法提取应力与非应力条件下的髓核细胞外泌体,流式细胞术检测外泌体纯度与浓度.以PKH67荧光染料标记外泌体,将应力与非应力条件下的髓核细胞外泌体分别与终板软骨细胞共孵育24 h,以单独培养的终板软骨细胞为对照,观察终板软骨细胞对外泌体的摄取情况、终板软骨细胞的凋亡和活性以及终板软骨细胞基质中相关基因的mRNA表达.结果 与结论:①一定条件的循环牵张力刺激可促进髓核细胞外泌体分泌,且该条件下的外泌体颗粒浓度高于非应力条件;②倒置荧光显微镜下可见,应力与非应力条件下的髓核细胞外泌体均可被终板软骨细胞摄取;③CCK8与流式细胞术检测显示,应力组终板软骨细胞的活性低于对照组(P<0.05)、凋亡率高于对照组(P<0.05);④RT-PCR检测显示,与对照组比较,非应力组基质金属蛋白酶3、骨形态发生蛋白2 mRNA表达增加(P<0.05);与对照组比较,应力组Ⅱ型胶原mRNA表达降低(P<0.05),解聚蛋白样金属蛋白酶5、基质金属蛋白酶3及β-连环蛋白mRNA表达升高(P<0.05);与非应力相比,应力组Ⅱ型胶原mRNA表达降低(P<0.05),解聚蛋白样金属蛋白酶5、基质金属蛋白酶3及骨形态发生蛋白2 mRNA表达升高(P<0.05);⑤结果表明一定条件的应力可促进髓核细胞外泌体分泌,且该条件下的外泌体可抑制终板软骨细胞的活性,造成细胞基质合成与分解代谢紊乱.
关键词：循环牵张力髓核细胞外泌体终板软骨细胞微环境椎间盘退行性变异常应力
分类号：R459.9(治疗学)R318(医用一般科学)R274.9(中医骨伤科学)
资助基金：国家自然科学基金(81930118)国家自然科学基金(81774330)国家自然科学基金(81804120)人才支持计划项目(ZYYCXTD-C-202003)中国中医科学院基本科研业务费优秀青年科技人才(创新类)培养专项项目(ZZ13-YQ-038)
论文发表日期：2023-01-11
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 223-229 )
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