敲低NIPBL基因调控小鼠骨髓间充质干细胞向软骨的分化
马雯晴1
张惠荣2
刘辉1
董丽丽1
杨眷娣1
1.石河子大学医学院,新疆维吾尔自治区石河子市 8320032.石河子大学医学院第一附属医院儿科,新疆维吾尔自治区石河子市 832003
摘要：背景:目前已将NIPBL基因突变作为诊断Cornelia de Lange综合征的首选指标,但由于该病的遗传异质性,显著增加了临床诊疗难度,尤其患儿骨骼发育畸形的发生率高,其发病机制尚不明确,目前无有效治疗方案,患儿平均寿命较一般人群显著缩短.目的:探究敲低NIPBL基因对小鼠骨髓间充质干细胞成软骨分化能力的影响及其可能的分子调控机制.方法:将慢病毒转染NIPBL shRNA的小鼠骨髓间充质干细胞作为sh-NIPBL组,慢病毒空载体转染的骨髓间充质干细胞作为sh-NC组,无慢病毒干扰的骨髓间充质干细胞作为空白对照组,对上述3组细胞进行成软骨诱导培养,诱导21 d后测量软骨微球最大横截面的周长,行阿利辛蓝染色鉴定其诱导分化结果,免疫荧光法检测软骨细胞Ⅱ型胶原的表达水平,应用实时荧光定量PCR法检测软骨细胞Sox-9、TGF-β1、Smad2、Smad4 mRNA表达水平.结果 与结论:①成软骨诱导第21天,sh-NIPBL组的软骨微球最大横截面的周长明显小于对照组(P<0.05),阿利辛蓝染色后在倒置显微镜下观察sh-NC组较sh-NIPBL组可见更多的蓝色软骨内酸性黏多糖;②诱导成软骨分化后,sh-NIPBL组骨髓间充质干细胞中Ⅱ型胶原、Sox-9的表达低于sh-NC组和空白对照组(P<0.05);③成软骨诱导过程中,sh-NIPBL组TGF-β1、Smad2、Smad4基因的表达水平低于sh-NC组和空白对照组(P<0.05);④结果表明,慢病毒敲低NIPBL基因表达降低了骨髓间充质干细胞的成软骨分化能力,且该过程可能由TGF-β1/Smad信号通路参与介导.
关键词：NIPBL基因骨骼发育缺陷慢病毒转染成软骨分化TGF-β1/Smad信号通路Cornelia de Lange综合征
分类号：R446(诊断学)R318(医用一般科学)R729(小儿其他疾病)
资助基金：国家自然科学基金(81660260)
论文发表日期：2023-04-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1477-1483 )
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