甲基丙烯酰化明胶/富血小板血浆复合水凝胶构建仿生微环境促进小鼠胰岛瘤细胞MIN6功能
朱必文1
王东芝1
吴迪1
龚天成2
潘昊鹏3
陆玉华1
郭益冰2
王志伟1
黄?1
1.南通大学附属医院,肝胆胰脾外科一,江苏省南通市 226001;南通大学附属医院,临床医学研究中心,江苏省南通市 226001;南通大学医学院,江苏省南通市 2260012.南通大学附属医院,临床医学研究中心,江苏省南通市 226001;南通大学医学院,江苏省南通市 2260013.南通大学附属医院,临床医学研究中心,江苏省南通市 226001
摘要：背景:构建仿生微环境促进胰岛素分泌细胞存活及功能发挥,是胰腺组织工程的热点与难点.目的:基于甲基丙烯酰化明胶/富血小板血浆水凝胶构建仿生微环境,促进小鼠胰岛瘤细胞MIN6存活和功能表达.方法:将体积分数10％,30％,50％的富血小板血浆溶液分别与50 g/L的甲基丙烯酰化明胶混合,经Ca2+与凝血酶活化及紫外光照射固化成水凝胶,分别记为G+10P、G+30P、G+50P,同时制备单纯的甲基丙烯酰化明胶水凝胶(记为G),检测4组水凝胶的孔隙率、杨氏模量、溶胀性能与流变行为.将4组水凝胶分别与小鼠胰岛瘤细胞MIN6共培养,检测细胞形态与增殖活性,并进行qRT-PCR检测、胰岛素免疫荧光染色及胰岛素释放实验.结果 与结论:①复合成分水凝胶的孔隙率小于单一成分水凝胶、杨氏模量高于单一成分水凝胶,并且随着富血小板血浆浓度的增加,复合成分水凝胶的孔隙率与杨氏模量降低;G+30P、G+50P组溶胀率低于G组、G+10P组(P<0.05);复合成分水凝胶的储能模量、耗能模量均大于单一成分水凝胶(P<0.05);②光镜下可见,单一成分水凝胶表面的细胞呈团块样且散在分布,复合成分水凝胶表面的细胞呈团状,但生长速度更快、细胞团之间连接紧密;活死染色显示,各组水凝胶可促进细胞存活,其中G+30P组、G+50P组死细胞数量明显少于G+10P组、G组;CCK-8检测显示,复合成分水凝胶促进细胞增殖效果强于单一成分水凝胶,并且随着富血小板血浆浓度的增加,促增殖效果更明显;③qRT-PCR检测显示,与单一成分水凝胶比较,复合成分水凝胶可明显上调胰岛十二指肠同源盒1、胰岛素、葡萄糖激酶的mRNA表达,其中以G+30P组最明显;免疫荧光与胰岛素释放实验显示,与单一成分水凝胶比较,复合成分水凝胶可促进胰岛素蛋白的表达及胰岛素释放;④结果表明,甲基丙烯酰化明胶/富血小板血浆复合水凝胶可用于模拟胰岛素分泌细胞微环境,能够显著提高其存活和功能发挥.
关键词：甲基丙烯酰化明胶富血小板血浆水凝胶胰岛素小鼠胰岛瘤细胞仿生微环境糖尿病
分类号：R459.9(治疗学)R318.08(医用一般科学)R657.5(外科学各论)
资助基金：国家自然科学基金(82001977)江苏省自然科学基金(BK20201445)
论文发表日期：2023-04-21
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 1824-1831 )
英文信息