β-catenin基因沉默对肝癌干细胞干性转录因子的影响
孙华1
覃艳春2
荣震3
李祖隆2
蒋锐沅2
钟晓婷2
莫春梅3
1.深圳市宝安纯中医治疗医院,广东省深圳市 518101;广西中医药大学,广西壮族自治区南宁市 5302002.广西中医药大学,广西壮族自治区南宁市 5302003.深圳市宝安纯中医治疗医院,广东省深圳市 518101
摘要：背景:肝癌干细胞是导致癌细胞形成、更新和增殖的原因,寻找针对肝癌干细胞治疗的关键靶点,并进一步拓展肝癌综合治疗手段是重要研究课题.目的:观察β-catenin基因沉默后CD133+HepG2细胞干性转录因子变化,探讨β-catenin调控肝癌干细胞干性的作用机制.方法:采用免疫磁珠筛选CD133+HepG2细胞,然后经干细胞培养基诱导、扩增方案获得CD133+HepG2肝癌干细胞,流式细胞术鉴定CD133+HepG2细胞阳性率,RNA干扰技术构建沉默β-catenin基因表达的 β-catenin-shRNA慢病毒质粒,转染CD133+HepG2肝癌干细胞72 h,荧光标记并评估转染效率.确认β-catenin沉默后,平板克隆形成实验观察CD133+HepG2肝癌干细胞增殖情况,流式细胞术检测CD133+HepG2肝癌干细胞的细胞周期,qRT-PCR和Western blot检测干性转录因子SOX2,NANOG,OCT4的mRNA及蛋白表达水平.结果 与结论:与空白对照组和病毒空载组相比,病毒干扰组的细胞克隆形成能力明显降低,G0/G1期细胞百分比明显增多,S期和G2/M期细胞百分比降低,NANOG、SOX2、OCT4的蛋白和mRNA表达水平明显降低(P<0.05),提示下调β-catenin表达可能对抑制肝癌干细胞的干性水平具有潜在作用.
关键词：肝癌干细胞干细胞转录因子β-cateninRNA干扰CD133HepG2
分类号：R459.9(治疗学)R318(医用一般科学)R735(消化系肿瘤)
资助基金：国家传染病防治重大专项课题(2018ZX10303502-001)国家传染病防治重大专项课题(2018ZX10303502-002)国家自然科学基金(81760850)
论文发表日期：2023-05-21
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 2297-2303 )
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