miR-889-3p靶向Runx2抑制脂肪间充质干细胞的成骨分化
张耀天1
崔军2
刘晶毅2
1.沈阳医学院,辽宁省沈阳市 1100002.沈阳医学院附属中心医院,辽宁省沈阳市 110000
摘要：背景:研究表明miR-889-3p可参与调控多种细胞的增殖分化过程,但是其对脂肪间充质干细胞成骨分化的影响尚不明确.目的:探讨miR-889-3p对脂肪间充质干细胞成骨分化的调节作用.方法:体外分离、培养SD大鼠脂肪间充质干细胞,转染miR-889-3p模拟物(miR-889-3p mimic)、miR-889-3p抑制剂(miR-889-3p inhibitor)和阴性对照(miR-NC)并诱导成骨分化.RT-PCR和Western blot检测成骨诱导14 d后的碱性磷酸酶活性、Runx2、骨钙素、骨桥素、Osterix等成骨相关mRNA和蛋白的表达.将野生型Runx2、突变型Runx2分别与miR-889-3p模拟物和miR-NC共转染脂肪间充质干细胞,通过双荧光素酶报告基因检测miR-889-3p与Runx2的靶向关系.结果 与结论:①miR-889-3p表达水平随成骨诱导时间延长而逐渐减低;②成骨诱导第7天和第14天miR-889-3p inhibitor组的矿化结节数目、大小、颜色深浅明显超过miR-889-3p mimic组和miR-NC组(P<0.05);③miR-889-3p过表达后,碱性磷酸酶活性、Runx2、骨钙素、骨桥素、Osterix mRNA及蛋白表达量显著降低,而miR-889-3p敲除后成骨相关mRNA和蛋白表达量明显提高;④双荧光素酶报告基因检测结果显示miR-889-3p过表达显著降低了野生型Runx2的荧光素酶活性;⑤上述结果表明,miR-889-3p通过靶向Runx2负向调控脂肪间充质干细胞成骨分化.
关键词：miR-889-3pRunx2脂肪间充质干细胞成骨分化骨缺损
分类号：R459.9(治疗学)R318(医用一般科学)R394.2(医学遗传学)
资助基金：辽宁省自然科学基金指导计划项目(20180550071)
论文发表日期：2023-07-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 3023-3028 )
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