帕罗西汀干预破骨细胞分化的作用机制
莫耀民1
刘槃1
马瑞鑫2
曾高峰3
宗少晖1
1.广西医科大学第一附属医院脊柱骨病外科,广西壮族自治区南宁市 5300002.广西医科大学,再生医学与医用生物资源开发应用省部共建协同创新中心,广西壮族自治区南宁市 5300003.广西医科大学,公共卫生学院,广西壮族自治区南宁市 530000
摘要：背景:破骨细胞过度活化是骨质疏松症发生、发展过程中的关键环节,探究破骨细胞功能、开发具有抑制破骨细胞分化减少骨重吸收的药物,是当前探索骨质疏松症临床治疗的重要手段.目的:基于MAPK/核因子κB信号通路,分析帕罗西汀影响破骨细胞分化的作用机制.方法:①体外实验:采用CCK-8实验检测不同浓度帕罗西汀对小鼠骨髓源性巨噬细胞增殖的影响.在巨噬细胞集落刺激因子和核因子κB受体活化因子配体的诱导下,使用不同浓度帕罗西汀干预破骨细胞分化,抗酒石酸酸性磷酸酶染色确定破骨细胞数目;RT-qPCR检测帕罗西汀对破骨细胞分化相关细胞因子mRNA表达的影响;Western Blot检测帕罗西汀对小鼠骨髓源性巨噬细胞中核因子κB、MAPK信号通路及破骨细胞相关蛋白表达的影响.②体内实验:将40只C57BL/6小鼠按随机数字表分为空白对照组、脂多糖组、帕罗西汀2 mg/kg,5 mg/kg组,每组10只.脂多糖组、帕罗西汀2 mg/kg,5 mg/kg组每2 d颅骨矢状缝皮下注射脂多糖(构建小鼠颅骨骨溶解模型),帕罗西汀两组每次皮下注射脂多糖1 d后注射对应剂量的帕罗西汀,14 d后,分离颅骨进行Micro-CT扫描分析.结果 与结论:①体外实验:当帕罗西汀浓度≤5μmol/L时对小鼠骨髓源性巨噬细胞的增殖无影响,浓度大于10μmol/L时抑制细胞的增殖;当帕罗西汀浓度≥0.5μmol/L时,可明显抑制破骨细胞分化的数量及形态,抑制破骨细胞分化c-Fos、Nfatc1、Ctsk、Mmp9、Acp5、Atp6v0d2的mRNA表达水平;0.5μmol/L的帕罗西汀可通过抑制核因子κB、MAPK信号通路的激活,进而抑制破骨细胞相关蛋白c-Fos、Nfatc1、Ctsk的表达;②体内实验:Micro-CT扫描分析结果显示,与脂多糖组比较,帕罗西汀5 mg/kg组可以有效提高骨小梁数量、骨体积分数(P<0.05),降低骨表面积骨体积比、骨小梁分离度(P<0.05);③结果 表明,帕罗西汀可以通过抑制破骨细胞分化减少骨的重吸收,具有潜在的治疗骨质疏松症作用.
关键词：帕罗西汀MAPK核因子κB破骨细胞骨质疏松骨髓源性巨噬细胞
分类号：R459.9(治疗学)R313(医用一般科学)R683(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)
资助基金：国家自然科学基金(81860402)
论文发表日期：2023-11-11
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 5184-5190 )
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