天冬氨酸-谷氨酸载体1调节脑室周围白质软化早产鼠的髓鞘形成

王丽珍; 羊才进; 陈蓉; 李玲

摘要：背景:脑室周围白质软化是早产儿最严重的医疗并发症之一,目前尚无有效治疗措施.目的:探讨天冬氨酸-谷氨酸载体1(aspartate-glutamate carrier 1,AGC1)对脑室周围白质软化早产鼠髓鞘形成的调节作用.方法:60只出生后第2天雄性SD幼鼠随机分为假手术组和脑室周围白质软化组(n=30).体外分离5只2日龄SD大鼠室周白质组织,制备白质祖细胞,建立实验性缺氧葡萄糖剥夺模型.分别在建立脑室周围白质软化、缺氧葡萄糖剥夺模型前,采用AGC1质粒(pcDNA3-AGC1)处理大鼠或细胞.在造模后不同时间点通过实时荧光定量PCR检测室周白质组织和细胞中AGC1表达.在脑室周围白质软化后14 d,采用免疫荧光法检测髓鞘碱性蛋白、别藻蓝蛋白表达,电子显微图像观察放射冠和胼胝体的超微结构.结果与结论:①在脑室周围白质软化后14 d,与假手术组相比,脑室周围白质软化组大鼠白质中髓鞘碱性蛋白表达、别藻蓝蛋白阳性少突胶质细胞数量以及有髓轴突数量显著减少(P<0.01);②与0 h相比,体内脑室周围白质软化开始后12-24 h时AGC1 mRNA表达显著升高(P<0.05),而在72 h-14 d时显著降低(P<0.05);③在体外对照条件下,与对照组相比,在缺氧葡萄糖剥夺后24-48 h时AGC1 mRNA表达显著升高(P<0.05),而在缺氧葡萄糖剥夺后7-14 d时AGC1 mRNA表达以及髓鞘碱性蛋白+/AGC1+少突胶质细胞形成显著降低(P<0.05);④pcDNA3-AGC1处理组在脑室周围白质软化后14 d处髓鞘碱性蛋白染色、别藻蓝蛋白阳性少突胶质细胞数量和有髓轴突数量比pcDNA3-NC对照组显著增多(P<0.05);⑤在体外实验中,增强AGC1表达进一步促进了缺氧葡萄糖剥夺后72?h、7 d和14 d时少突胶质细胞前体细胞分化为髓鞘碱性蛋白+/AGC1+?少突胶质细胞(P<0.05);提示脑室周围白质软化早产鼠模型和体外缺氧葡萄糖剥夺细胞模型中AGC1表达下调,通过上调AGC1可促进少突胶质细胞分化和髓鞘形成.