高表达软骨调素1骨髓间充质干细胞来源外泌体促进骨关节炎软骨细胞的增殖
吴志文1
申恩谱1
李贝贝1
刘丹平1
綦惠2
1.锦州医科大学附属第一医院,辽宁省锦州市 1210002.北京市创伤骨科研究所,北京积水潭医院,北京市 100035
摘要：背景:软骨调素1(chondromodulin-1,Chm-1)在正常软骨中大量表达,具有抑制血管生成、阻止软骨细胞肥大、缓解骨关节炎发展的功能,在骨关节炎发生和发展中发挥着重要作用.目的:探讨高表达Chm-1骨髓间充质干细胞来源外泌体对骨关节炎环境中软骨细胞增殖的影响.方法:分离大鼠骨髓间充质干细胞并进行培养及鉴定;Chm-1慢病毒和空载慢病毒转染骨髓间充质干细胞,超高速离心法提取细胞培养上清液中外泌体(Chm-1-Exos和NC-Exos).白细胞介素1β 作用软骨细胞24 h构建体外骨关节炎模型,随后分别用2种外泌体处理7 d,将PBS处理的骨关节炎软骨细胞作为对照组.共聚焦显微镜观察骨关节炎软骨细胞对外泌体的摄取情况;CCK-8评估各组骨关节炎软骨细胞增殖能力;Western blot检测2种外泌体中Chm-1的表达;Western blot和RT-qPCR方法分别检测各组骨关节炎软骨细胞中Ⅱ型胶原、SOX9、AGG蛋白和mRNA的表达.结果 与结论:①骨髓间充质干细胞呈典型纺锤状形态且具备三系分化能力;②带有绿色荧光的慢病毒成功转染骨髓间充质干细胞;③外泌体直径在40-150 nm之间,且均表达其特异性标志蛋白CD63、CD81、TSG101,能够被骨关节炎软骨细胞摄取;④相比于NC-Exos,Chm-1-Exos中Chm-1的表达更高(P<0.05);⑤NC-Exos和Chm-1-Exos分别作用骨关节炎软骨细胞24 h后,Chm-1-Exos组骨关节炎软骨细胞活性更强;⑥NC-Exos和Chm-1-Exos分别作用骨关节炎软骨细胞7 d后,Chm-1-Exos组的Ⅱ型胶原、SOX9、AGG蛋白和mRNA表达更高(P<0.05);⑦上述实验结果表明,Chm-1-Exos能够显著促进骨关节炎软骨细胞的增殖.
关键词：骨关节炎骨髓间充质干细胞外泌体软骨细胞Chm-1
分类号：R459.9(治疗学)R318(医用一般科学)R681.3(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)
资助基金：国家自然科学基金(81572140)
论文发表日期：2023-11-21
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 5277-5282 )
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