农杆菌介导注射法建立番茄子叶瞬时表达系统
郎遥玲1
王倩2
陈彬2
白国辉2
管晓燕2
刘建国2
1.贵州省普通高等学校口腔疾病研究特色重点实验室暨遵义市口腔疾病研究重点实验室,遵义医科大学口腔医学院,贵州省遵义市 563000;贵阳市口腔医院,贵州省贵阳市 5500022.贵州省普通高等学校口腔疾病研究特色重点实验室暨遵义市口腔疾病研究重点实验室,遵义医科大学口腔医学院,贵州省遵义市 563000
摘要：背景:转基因植物生产口服疫苗具有较大的优势及广阔的应用前景.目前,关于番茄瞬时表达系统的研究罕见报道,对番茄瞬时表达条件进行优化,可使植株的遗传转化效率大幅度提高.目的:利用农杆菌介导的注射法,建立番茄子叶瞬时表达系统,检测植物表达载体pCAMBIA-E8-APB-DOCK8中外源基因的转录水平.方法:通过对番茄无菌苗的培育,观察不同番茄品种的出芽数、成苗数及农艺学性状的差异显著性,筛选出适用于此实验的番茄品种,将前期构建的植物表达载体pCAMBIA-E8-APB-DOCK8转化到农杆菌EHA105中,通过对番茄子叶、注射农杆菌浓度、农杆菌注射量、生长苗龄以及共培养天数进行筛选,建立农杆菌介导的番茄子叶瞬时表达系统,观察报告基因的转录水平.结果与结论:初步建立番茄子叶瞬时表达系统,筛选出适合的番茄品种为欧洲大红(苹果型),选材部位为番茄的子叶,注射农杆菌浓度A600为0.2-0.7,农杆菌注射量为50 μL,苗龄为7-10 d,共培养24-48 h.该实验为后期外源基因蛋白表达分析研究提供一种方便、快捷和有效的方法.
关键词：番茄农杆菌介导瞬时表达系统构建E8-APB-DOCK8植物疫苗转录分析
分类号：R459.9(治疗学)R318(医用一般科学)R781.1(口腔内科学)
资助基金：国家自然科学基金(81260164)贵州省委组织部贵州省第六批人才基地(RCJD2019-9)贵州省卫生健康委科学技术基金项目(gzwkj2021-351)
论文发表日期：2023-12-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 5462-5468 )
英文信息