骨痹散干预膝骨关节炎兔软骨组织相关信号通路的变化

李东东; 陈光友; 李晓明; 吴雪莲; 朱凯; 雷杨; 易露

摘要：背景:Wnt信号转导的活化与膝骨关节炎的发病机制密切相关,当前对Wnt信号通路的研究侧重于Wnt/β-catenin信号通路及其激活或抑制蛋白的表达.目的:观察院内协定处方骨痹散对膝骨关节炎模型兔体内炎症因子与Notch3/Hes1及Wnt/β-catenin信号通路的影响,为临床治疗提供新的用药思路.方法:将40只新西兰大白兔随机分为假手术组、模型组、阳性组与骨痹散组,每组10只,使用改良Hulth法构建兔膝骨关节炎模型,持续造模8周,模型构建完毕后假手术组、模型组膝骨关节处涂抹生理盐水,阳性组涂抹双氯芬酸钾凝胶,骨痹散组涂抹骨痹散,每天敷8 h,连续1周.给药完毕后观察动物活动情况并进行行为学评分,ELISA法检测血清中前列腺素E2、环氧化酶2、白细胞介素1β与肿瘤坏死因子α水平,苏木精-伊红染色与番红O染色观察软骨组织病变情况,免疫组织化学法检测膝关节软骨组织中基质金属蛋白酶1,2,3,13蛋白的表达水平,Western blot法检测膝关节软骨组织中Notch3、Hes1、Wnt5a、β-catenin、Bcl-2、Bax、Caspase-3的蛋白表达水平.结果与结论:①与假手术组相比,模型组动物行走困难,膝关节软骨组织损伤严重,血清中前列腺素E2、环氧化酶2、白细胞介素1β与肿瘤坏死因子α水平升高(P<0.05),软骨组织中基质金属蛋白酶1,2,3,13和Bax、Caspase-3、Wnt5a、β-catenin蛋白表达升高(P<0.05),Notch3、Hes1、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);②与模型组相比,骨痹散组动物行走情况良好,血清中前列腺素E2、环氧化酶2、白细胞介素1β与肿瘤坏死因子α水平降低(P<0.05),膝关节软骨组织损伤减轻,软骨组织中基质金属蛋白酶1,2,3,13和Bax、Caspase-3、Wnt5a、β-catenin蛋白表达降低(P<0.05),Notch3、Hes1、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05);③结果表明,院内协定处方骨痹散能减轻兔膝骨关节炎的症状,改善软骨组织病变,减少血清中炎症因子水平,作用机制可能与调控Notch3/Hes1、Wnt/β-catenin信号通路有关.