DOI: 10.12307/2023.122
过表达Sema3A促进牙髓干细胞和MC3T3-E1的成骨分化
王雯1
郑芃芃2
孟浩浩2
刘浩1
袁长永1
1.徐州医科大学口腔医学院,江苏省徐州市 221004;徐州医科大学附属口腔医院,江苏省徐州市 2210022.徐州医科大学口腔医学院,江苏省徐州市 221004
摘要：背景:Sema3A是一种强有力的骨保护因子.目前,关于Sema3A基因修饰牙髓干细胞(pulp stem cells,DPSCs)在骨再生方面的研究较少.
目的:探讨Sema3A修饰的DPSCs(Sema3A-DPSCs)的成骨分化能力,及其对前成骨细胞系MC3T3-E1成骨分化的调控作用.
方法:首先,使用慢病毒载体将Sema3A基因转导至DPSCs构建Sema3A-DPSCs,以对照慢病毒处理的DPSCs(Vector-DPSCs)为对照,然后将Sema3A-DPSCs或Vector-DPSCs与前成骨细胞系MC3T3-E1以1∶1及1∶3比例共培养24 h,最后将单独培养的Sema3A-DPSCs、Vector-DPSCs以及二者与MC3T3-E1共培养细胞进行成骨诱导分化,通过碱性磷酸酶染色、茜素红染色、实时定量RT-PCR检测成骨基因表达评价成骨分化能力.
结果与结论:①Sema3A-DPSCs中Sema3A mRNA及蛋白表达水平显著上调,细胞上清液中分泌型Sema3A水平上调;②与Vector-DPSCs相比,Sema3A-DPSCs中成骨相关基因碱性磷酸酶、Runt相关转录因子2、骨钙素、Sp7转录因子的mRNA表达上调,碱性磷酸酶活力增强,矿化结节形成增多;③Vector-DPSCs与Sema3A-DPSCs的增殖能力无显著差异;④相比于MC3T3-E1/Vector-DPSCs共培养体系,MC3T3-E1/Sema3A-DPSCs共培养体系中MC3T3-E1细胞的成骨相关基因表达上调,总的碱性磷酸酶活性增强并有更多矿化结节形成;⑤结果提示:过表达Sema3A可增强DPSCs的成骨分化能力;在DPSCs中过表达Sema3A可促进DPSCs/MC3T3-E1共培养体系中MC3T3-E1成骨分化.
关键词：干细胞治疗基因治疗Sema3A牙髓干细胞成骨细胞成骨分化
分类号：R459.9(治疗学)R318(医用一般科学)R394.2(医学遗传学)
论文发表日期：2024-03-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 993-999 )
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