利鲁唑干预脊髓损伤大鼠小胶质细胞中NLRP3炎性小体的活化

刘涛; 张文凯; 马子谦; 张焱; 陈学明

doi:10.12307/2024.127

摘要：背景:既往动物实验研究发现利鲁唑可抑制脊髓损伤后神经炎症反应,促进损伤大鼠功能恢复,但其是否可在急性期调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎性小体的表达缺乏研究. 目的:通过动物实验、组织学实验、分子生物学实验观察利鲁唑是否通过调控NLRP3炎性小体减轻脊髓损伤后小胶质细胞焦亡,促进功能恢复. 方法:将雌性SD大鼠分为假手术组、模型组、利鲁唑组,每组12只.除假手术组外行大鼠T10脊髓损伤,模型组腹腔给药利鲁唑的溶剂环糊精,利鲁唑组注射4 mg/kg利鲁唑治疗.采用BBB评分、斜板实验评估利鲁唑对运动功能恢复的影响;电生理检测感觉诱发电位和运动诱发电位的恢复情况;苏木精-伊红染色评估脊髓组织修复情况;Western blot方法检测利鲁唑对脊髓组织中NLRP3、半胱氨酸蛋白酶1、消皮素D蛋白表达的调控作用;ELISA检测炎症因子白细胞介素1β、白细胞介素18表达水平;免疫荧光染色检测利鲁唑对脊髓损伤组织中小胶质细胞中NLRP3、半胱氨酸蛋白酶1、消皮素D、白细胞介素1β表达的影响. 结果与结论:①脊髓损伤后35 d,利鲁唑组大鼠BBB评分和斜板实验评分均高于模型组(P<0.05);②脊髓损伤后3 d,利鲁唑组脊髓组织匀浆中NLRP3、活化半胱氨酸蛋白酶1、消皮素D氨基端蛋白、白细胞介素1β、白细胞介素18蛋白表达明显低于模型组(P<0.05);③脊髓损伤后3 d,免疫荧光实验显示利鲁唑组NLRP3、半胱氨酸蛋白酶1、消皮素D、白细胞介素1β荧光强度明显低于模型组(P<0.05);④脊髓损伤后35 d,苏木精-伊红染色显示利鲁唑组脊髓损伤面积比模型组更小;电生理检测显示利鲁唑组感觉诱发电位与运动诱发电位潜伏期均较模型组缩短,波幅较模型组提高;⑤以上结果可表明,利鲁唑促进损伤脊髓组织、神经传导功能修复进而促进脊髓损伤大鼠运动功能恢复,可能是通过调控NLRP3炎性小体、减轻小胶质细胞焦亡实现的.