DOI: 10.12307/2024.133
缺氧后处理通过piRNA-005854调控衰老心肌细胞自噬发挥保护心肌作用
迟宏扬1
杨慧霞1
郝银菊2
杨安宁3
白志刚4
焦运5
熊建团3
马胜超3
姜怡邓3
1.宁夏医科大学,临床医学院,宁夏回族自治区 银川市 750004;宁夏医科大学,国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室,宁夏回族自治区 银川市 7500042.宁夏医科大学,药学院,宁夏回族自治区 银川市 7500043.宁夏医科大学,国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室,宁夏回族自治区 银川市 750004;宁夏医科大学,基础医学院,宁夏回族自治区 银川市 7500044.宁夏医科大学,国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室,宁夏回族自治区 银川市 750004;宁夏回族自治区人民医院,宁夏回族自治区 银川市 7500045.宁夏医科大学,国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室,宁夏回族自治区 银川市 750004;宁夏医科大学总医院感染科,宁夏回族自治区 银川市 750004
摘要：背景:缺血后处理是减轻缺血再灌注损伤的有效方式之一,近年来被越来越广泛地应用于临床实践,但其具体分子机制还有待研究.
目的:探讨piRNA-005854在衰老心肌细胞缺氧后处理中的作用及机制.
方法:体外给予心肌细胞8 mg/mL D-半乳糖9 d诱导其衰老,β-半乳糖苷酶染色观察心肌细胞的衰老情况;衰老后细胞给予缺氧/复氧处理和缺氧后处理,ELISA检测心肌损伤标志物肌酸激酶同工酶MB以及乳酸脱氢酶水平;Western blot检测衰老心肌细胞中自噬相关蛋白LC3Ⅱ、p62和ULK1及其磷酸化ULK1的表达;qRT-PCR检测piRNA-005854的表达水平;进一步用piRNA-005854 inhibitor及piRNA-005854 mimics转染衰老心肌细胞并进行缺氧后处理,Western blot检测LC3Ⅱ、p62和ULK1及其磷酸化ULK1的表达.
结果与结论:①D-半乳糖诱导9 d后心肌细胞出现明显衰老;②与正常氧组比较,缺氧/复氧组肌酸激酶同工酶MB以及乳酸脱氢酶水平增加(P<0.01);LC3Ⅱ/Ⅰ表达升高、p62表达降低、ULK1磷酸化水平升高、piRNA-005854表达升高(P<0.01);③与缺氧/复氧组比较,缺氧后处理组肌酸激酶同工酶MB以及乳酸脱氢酶水平明显减少(P<0.01);LC3Ⅱ/Ⅰ表达明显降低(P<0.05)、p62表达升高(P<0.01)、ULK1磷酸化水平降低(P<0.05)、piRNA-005854表达降低(P<0.01);④转染piRNA-005854 inhibitor后,LC3Ⅱ/Ⅰ表达降低(P<0.01),p62表达明显升高(P<0.05),ULK1磷酸化水平明显降低(P<0.01);转染piRNA-005854 mimics后,LC3Ⅱ/Ⅰ表达显著升高,p62表达降低,ULK1磷酸化水平明显增加(P<0.01);⑤结果表明,piRNA-005854介导的ULK1依赖性自噬水平降低是衰老心肌细胞缺氧后处理发挥保护作用的可能机制.
关键词：piRNA自噬衰老心肌细胞缺血再灌注损伤缺氧/复氧缺氧后处理
分类号：R459.9(治疗学)R318(医用一般科学)R541(心脏、血管（循环系）疾病)
论文发表日期：2024-05-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 2054-2060 )
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