DOI: 10.12307/2024.445
青蛙皮肤活性肽QUB2984的重组表达及体外活性评价
唐子琰1
顾顺强2
陈小玲3
王蕾3
马成帮3
周玫3
陈天豹3
杜丽娜1
金义光1
1.军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所,北京市 1008502.武警宁夏总队医院急诊科,宁夏回族自治区 银川市 7500003.英国贝尔法斯特女王大学药学院天然药物研究组,英国贝尔法斯特 BT7 1NN
摘要：背景:青蛙活性肽有丰富活性,如抗菌、抗肿瘤,有望解决抗生素耐药性问题.
目的:从红眼树蛙皮肤分泌物中发现活性肽QUB2984,采用生物信息学手段模拟其结构和性质,合成、纯化、鉴定该肽并考察其生物学功能.
方法:采用电刺激得到红眼树蛙皮肤分泌物,分离出mRNA构建cDNA文库,测序得到肽序列.用生物大分子序列搜索工具进行肽序列比对,蛋白质结构模型和功能预测工具开展蛋白二级结构模拟.通过固相合成法合成多肽、反向高效液相进行纯化、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱进行验证.所获得的纯肽用于生物活性评价,采用最小抑菌浓度法评价其抗菌作用,MTT法检测其细胞毒作用,溶血实验考察其安全性.
结果与结论:①所得活性肽QUB2984的结构预测为α-螺旋,有完整的疏水面,对生物膜有一定破坏能力,其序列上第3个氨基酸位置由W组成,并具有G-X-G结构;②活性肽QUB2984对革兰阳性金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为2 μmol/L,对革兰阴性大肠杆菌的最小抑菌浓度为2 μmol/L,对真菌白色念珠菌的最小抑菌浓度为8 μmol/L;③活性肽QUB2984在10-5 mol/L浓度下对人非小细胞肺癌细胞NCI-H838具有明显抑制作用,在64 μmol/L浓度下对马红细胞的溶血作用为50%;④结果显示,QUB2984具有抗菌抑癌活性,其带+3正电荷,有利于与细菌或细胞接触.
关键词：生物活性肽生物合成结构模拟构效关系分离纯化抗菌抑癌溶血评价
分类号：R459.9(治疗学)R318.08(医用一般科学)R931(生药学（天然药物学）)
论文发表日期：2024-06-11
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 2675-2681 )
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