DOI: 10.12307/2024.188
补肾活血方促进脂肪间充质干细胞类髓核分化的作用机制
郭泽华1
李兆勇2
陈龙2
段嘉豪1
蒋浩波1
陈光学1
苏友贤1
刘恩旭1
杨少锋2
1.湖南中医药大学,湖南省长沙市 410208;湖南中医药大学第一附属医院,湖南省长沙市 4100072.湖南中医药大学第一附属医院,湖南省长沙市 410007
摘要：背景:干细胞移植是防治椎间盘退变的新思路,但移植后的干细胞如何顺利存活、增殖、分化,并恢复髓核细胞功能,是目前亟需克服的重点和难点.
目的:探讨补肾活血方对脂肪间充质干细胞存活、增殖、类髓核分化的影响.
方法:采用Transwell小室构建人脂肪间充质干细胞和人退变髓核细胞共培养模型.实验分为对照组、模型组、含药血清组、无药血清组,除对照组外,其余各组均用50 μmol/L叔丁基过氧化氢干预24 h,然后含药血清组和无药血清组分别予以含体积分数20%补肾活血方含药血清或无药血清的DMEM低糖完全培养液干预48 h,取下层脂肪间充质干细胞,甲苯胺蓝染色法观察蛋白聚糖合成水平,Real-Time PCR法检测Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、SOX9的mRNA表达,Western blot法检测SOX9的蛋白表达,乳酸脱氢酶法检测细胞毒性,流式细胞术检测细胞活性氧水平,β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老情况.
结果与结论:①与对照组相比,模型组坏死脱落细胞比例增加,甲苯胺蓝染色变浅,Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、SOX9 mRNA和SOX9蛋白表达水平下降(P<0.05);与模型组相比,补肾活血方含药血清可显著减轻细胞损伤并促进Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、SOX9 mRNA和SOX9蛋白表达(P<0.05),但无药血清组改善不明显(P>0.05);②与对照组相比,模型组细胞毒性、活性氧水平、细胞衰老水平显著增加;与模型组相比,补肾活血方干预后共培养体系微环境得到明显改善(P<0.05),无药血清对共培养体系微环境改善作用不明显(P>0.05);③结果表明,补肾活血方可以促进脂肪间充质干细胞存活、增殖、类髓核分化.
关键词：脂肪间充质干细胞髓核细胞共培养椎间盘退变补肾活血方氧化损伤
分类号：R459.9(治疗学)R318(医用一般科学)R274.3(中医骨伤科学)
论文发表日期：2024-09-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 3974-3980 )
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