DOI: 10.12307/2024.196
Ⅲ型纤连蛋白结构域包含蛋白5抑制巨噬细胞焦亡的作用机制
赵广建
刘大男
周博
王尧
贵州医科大学附属医院心内科,贵州医科大学医学科学研究所,贵州省贵阳市 550004
摘要：背景:Ⅲ型纤连蛋白结构域包含蛋白5(fibronectin type Ⅲ domain-containing protein 5,FNDC5)是一种肌肉因子,具有调节糖脂代谢、抗炎、抗氧化及改善胰岛素抵抗等功能,并且具有调节多种细胞焦亡的能力.
目的:探讨FNDC5对巨噬细胞焦亡的作用及潜在机制.
方法:①构建FNDC5基因过表达和沉默慢病毒载体,将慢病毒载体转染至THP-1细胞株,通过观察细胞绿色荧光表达、qPCR和Western blot验证转染效果.②佛波酯诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞,通过氧化性低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)构建巨噬细胞焦亡模型,分组:NC组、ox-LDL组、ox-LDL+MOCK1组、ox-LDL+Ov-FNDC5组、ox-LDL+MOCK2组和ox-LDL+shFNDC5组.③采用Hoechst 33342/PI荧光双染和乳酸脱氢酶释放实验评估细胞焦亡程度,采用qPCR和Western blot检测相关分子mRNA和蛋白表达水平,采用ELISA检测细胞上清液中白细胞介素1β和白细胞介素18释放水平.
结果与结论:与ox-LDL+MOCK1组相比,过表达FNDC5可显著降低巨噬细胞焦亡率以及乳酸脱氢酶、白细胞介素1β、白细胞介素18释放水平,显著抑制NF-κB p65、NF-κB p50、NLRP3、ASC、Caspase-1及GSDMD的mRNA表达,显著抑制NF-κB p65、NF-κB p50、NLRP3、ASC、Cleaved Caspase-1及GSDMD-N的蛋白表达;与ox-LDL+MOCK2组相比,沉默FNDC5则出现相反结果.结果表明:FDNC5可能通过抑制NF-κB/NLRP3通路缓解巨噬细胞焦亡.
关键词：巨噬细胞Ⅲ型纤连蛋白结构域包含蛋白5FNDC5NF-κBNLRP3细胞焦亡
分类号：R459.9(治疗学)R318(医用一般科学)R543.1(心脏、血管（循环系）疾病)
论文发表日期：2024-09-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 4005-4012 )
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