DOI: 10.12307/2024.190
Lewis大鼠骨髓来源成熟和未成熟树突状细胞的提取与鉴别
李立强1
李明皓2
李良3
李文波3
张军3
孔令梅3
1.合肥市第二人民医院肝胆外科/安徽医科大学附属合肥医院肝胆外科/蚌埠医学院附属合肥市第二人民医院教学医院,安徽省合肥市 230011;宁夏回族自治区人民医院肝胆外科,宁夏回族自治区 银川市 7500022.宁夏回族自治区人民医院肝胆外科,宁夏回族自治区 银川市 7500023.合肥市第二人民医院肝胆外科/安徽医科大学附属合肥医院肝胆外科/蚌埠医学院附属合肥市第二人民医院教学医院,安徽省合肥市 230011
摘要：背景:树突状细胞在未成熟阶段表现出极强的抗原吞噬功能,它可以在免疫耐受、癌症的免疫治疗等方面都表现出极大的优越性.但由于未成熟树突状细胞在生物体内含量极微,这就严重限制了它在临床、科研方面的应用.
目的:提取鉴别Lewis大鼠骨髓来源成熟和未成熟树突状细胞.
方法:从Lewis大鼠骨髓中分离骨髓前体细胞,应用20 ng/mL粒细胞集落刺激因子、10 ng/mL白细胞介素4培养7 d诱导为未成熟树突状细胞,然后在未成熟树突状细胞中加入1 μg/mL脂多糖继续培养2 d诱导为成熟树突状细胞.采用荧光倒置显微镜观察树突状细胞形态,流式细胞仪鉴定成熟和未成熟树突状细胞表面特异性分子,ELISA检测成熟和未成熟树突状细胞培养上清白细胞介素10、白细胞介素12和白细胞介素17A因子的分泌水平,混合淋巴细胞反应检测成熟和未成熟树突状细胞对T淋巴细胞的刺激反应.
结果与结论:①普通荧光倒置显微镜下观察树突状细胞具有明显的突起结构;②流式细胞仪可见未成熟树突状细胞低表达CD40、CD86等共刺激分子;相反,成熟树突状细胞高表达上述共刺激分子;③未成熟树突状细胞的白细胞介素10、白细胞介素17A分泌水平要远高于成熟树突状细胞(P<0.01);未成熟树突状细胞的白细胞介素12分泌水平低于成熟树突状细胞(P<0.05);④成熟树突状细胞对T细胞的刺激明显比成熟树突状细胞强,当成熟树突状细胞与T淋巴细胞比例达到1∶10时刺激能力更强;⑤结果表明:Lewis大鼠骨髓前体细胞可以分化为树突状细胞,通过流式细胞鉴定、相关因子检测、混合淋巴细胞反应能够鉴别树突状细胞的成熟和未成熟状态.
关键词：树突状细胞未成熟树突状细胞成熟树突状细胞细胞因子混合淋巴细胞反应
分类号：R459.9(治疗学)R392-3(医学免疫学)R617(外科手术学)
论文发表日期：2024-09-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 4013-4017 )
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