DOI: 10.12307/2024.180
骨形态发生蛋白4诱导下骨骼肌内异位骨化的细胞来源
余洋溢
廉强
吴建群
张轩
任晋可
李广恒
深圳市肌肉骨骼组织重建与功能恢复重点实验室,关节骨科,深圳市人民医院(暨南大学第二临床医学院,南方科技大学第一附属医院),广东省深圳市 510515
摘要：背景:骨骼肌异位骨化是临床上严重的并发症.对于骨骼肌异位骨化而言,其参与成骨过程中的细胞仍不明确.
目的:观察肌细胞及筋膜细胞以及内皮细胞在骨肌中异位骨化过程中的参与情况,观察骨形态发生蛋白4诱导下骨骼肌内异位骨化的细胞来源.
方法:培养C2C12细胞和诱导培养基数天下C2C12细胞形成的肌管,将质量浓度500 ng/mL 骨形态发生蛋白4分别加入培养基后,显微镜下观察处理10 d内 C2C12细胞和肌管是否继续增殖;按不同比例共培养大鼠肌细胞(L6)和人成纤维源性细胞(fibroblast-derived cells,FDC),通过番红O染色和阿尔新蓝染色研究上述细胞在质量浓度500 ng/mL的骨形态发生蛋白4和质量浓度10 ng/mL的转化生长因子β3处理下21 d内成骨和成软骨分化潜力.使用转基因动物FVB/N-TgN(TIE2-LacZ)182Sato小鼠,通过在基因鼠大腿肌间隙植入含有15 μL的腺相关病毒-骨形态发生蛋白4(5×1010 PFU/mL)10 d及14 d,再通过X-gal 染色来观察异化骨中有无新血管内皮生成.
结果与结论:①骨形态发生蛋白4导致肌束退化并增加C2C12细胞增殖.与其他组相比,FDC组具有较高的阿尔新蓝和番红O染色面积(P<0.05)和较低碱性磷酸酶染色面积(P<0.05);而L6组和其他组相比具有更大的碱性磷酸酶染色面积(P<0.05),但阿尔新蓝和番红O染色面积较小(P<0.05).②将腺相关病毒-骨形态发生蛋白4吸附的明胶海绵移植到FVB/N-TgN(TIE2-LacZ)182Sato小鼠中会导致异位骨化.③X-gal染色结果显示,在软骨细胞及异化骨中无明显染色,提示Tie2+内皮细胞不参与异位骨化的形成.④结果证实,在腺相关病毒-骨形态发生蛋白4诱导的骨骼肌异位软骨化过程中,成纤维细胞是软骨细胞的主要细胞来源,而肌源性细胞是成骨细胞的主要来源.Tie2+内皮细胞可能不是软骨和骨的细胞来源.
关键词：异位骨化骨形态发生蛋白4肌源性细胞纤维源性细胞Tie2+内皮细胞骨骼肌成骨细胞软骨细胞肌周膜肌束
分类号：R459.9(治疗学)R363(病理学)R364(病理学)
论文发表日期：2024-09-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 4034-4040 )
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